可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 近交系小鼠血清（C57BL/6J、BALB/c等） | 基因敲除与敲入小鼠表型分析、候选药物肝毒性初筛 | 丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、AST/ALT比值、总胆红素、总蛋白 | 速率法（国际临床化学联合会推荐条件）37℃、340nm连续监测 |
| 封闭群小鼠血清（ICR、KM小鼠） | 化学品与农药登记安全性评价、急性及亚慢性毒性试验配套生化检测 | ALT、AST、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰转肽酶（GGT）、肌酐、尿素氮 | 全自动生化分析仪速率法，肝功能组合同步测定 |
| 基因工程小鼠血清（db/db、ob/ob、ApoE-/-） | 代谢性肝病、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）机制研究与药物评价 | ALT、AST、甘油三酯、总胆固醇、游离脂肪酸 | 速率法联用酶法脂类指标，空腹采血 |
| 化学性肝损伤模型血清（四氯化碳、对乙酰氨基酚、D-半乳糖胺） | 保肝药物药效评价、天然产物肝保护活性筛选、模型验证 | ALT、AST升高幅度与动态变化、AST/ALT比值、总胆汁酸 | 造模后24-48小时峰值期采血，速率法定量，结合病理切片判读 |
| 免疫缺陷小鼠血清（裸鼠、NOD-SCID） | 肿瘤药物、抗体类药物临床前安全性评价 | ALT、AST、白蛋白、球蛋白、白球比 | 速率法联用溴甲酚绿法白蛋白测定 |
| 老龄与发育期小鼠血清（12月龄以上、断乳期） | 肝脏衰老功能研究、发育毒性评价 | ALT、AST、总蛋白、白蛋白 | 速率法，分周龄组统计判读 |
| 重复给药毒性试验血清（28天、90天周期） | 药物非临床安全性评价血液生化配套检测 | ALT、AST、ALP、GGT、总胆红素、总胆汁酸 | 生化分析仪多项目组合，恢复期复测观察可逆性 |
检测项目
1. 丙氨酸氨基转移酶（ALT）：成年C57BL/6J小鼠血清参考水平17-77U/L，肝细胞损伤最敏感指标，速率法37℃测定
2. 天冬氨酸氨基转移酶（AST）：参考水平50-150U/L，肝细胞损伤伴心肌或骨骼肌损伤时升高更显著
3. AST/ALT比值：正常约1.5-2.5，比值明显升高提示线粒体累及或肝外组织损伤
4. 配套肝胆功能指标：碱性磷酸酶30-120U/L、谷氨酰转肽酶0-5U/L、总胆红素1-10μmol/L，鉴别肝细胞性与胆汁淤积性损伤
5. 血清分离质量指标：游离血红蛋白不高于0.5g/L判为无溶血，单只血清得量0.1-0.3mL，离心条件1000-2000g×10-15min
检测范围
1. 近交系小鼠：C57BL/6J、BALB/c、C3H/He、DBA/2等品系
2. 封闭群小鼠：ICR小鼠、KM小鼠等
3. 基因工程小鼠：db/db、ob/ob、ApoE-/-及其他定向改造品系
4. 肝损伤与肝病模型：四氯化碳急性肝损伤、对乙酰氨基酚肝毒性、D-半乳糖胺联合脂多糖肝衰竭、胆碱缺乏饮食脂肪肝模型
5. 各生理阶段样品：断乳期（3周龄）、成年期（8-12周龄）、老龄期（12月龄以上）及妊娠期小鼠血清
检测方法
1. GB/T 35892-2018 实验动物福利伦理审查指南（采血及安乐死操作伦理审查依据）
2. GB 14925-2023 实验动物环境及设施（饲养屏障环境控制）
3. GB 14922-2022 实验动物微生物寄生虫学等级及监测（实验动物质量背景控制）
4. GB 14923-2022 实验动物遗传质量控制（品系遗传背景确认）
5. GB/T 22576.4-2021 医学实验室质量和能力的要求 第4部分：临床化学检验领域的要求
6. GB/T 26124-2011 临床化学体外诊断试剂（盒）（转氨酶试剂体系质量要求）
7. 血清ALT、AST速率法：按国际临床化学联合会推荐反应条件，37℃、340nm波长连续监测还原型辅酶一吸光度下降速率；经典赖氏比色法以卡门氏单位报告，适用于仪器条件有限的实验室（小鼠血清转氨酶测定无专属国家标准，上述通行方法与实验室质控标准结合执行）
检测设备
1. 全自动生化分析仪：速率法340nm检测，通量每小时200-400测试，反应舱控温37±0.1℃
2. 半自动生化分析仪：波长范围340-700nm，吸光度分辨0.001
3. 紫外可见分光光度计：波长190-1100nm，赖氏法比色测定
4. 恒温水浴锅：温度室温至100℃，控温精度±0.5℃
5. 高速冷冻离心机：转速500-15000rpm，温控4℃，血清分离
6. 电子天平：量程0-220g，可读性0.1mg，试剂配制称量
7. 可调移液器：量程覆盖0.5-1000μL，系统误差不高于±1%
8. 涡旋振荡混合器：转速300-3000rpm，试剂与样本混匀
9. 超低温冰箱：温度范围-86--40℃，血清样本长期保存
10. 小动物麻醉机：异氟烷蒸发浓度1%-5%，配合心脏采血等终末操作