可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 小鼠腹水瘤细胞(S180、H22、EAC等) | 移植性肿瘤模型传代培养中的细胞遗传质量监控 | 染色体众数、数目畸变率、结构畸变率、G显带核型 | 秋水仙素阻滞+低渗滴片法,GB/T 21794-2025中期相分析 |
| 小鼠实体瘤单细胞悬液(Lewis肺癌、4T1、CT26、B16来源) | 实体瘤模型生长与转移研究中的细胞遗传表征 | 倍性指数、染色体数目与结构畸变谱 | 组织解离制备单细胞悬液+中期相滴片+吉姆萨染色 |
| 小鼠传代细胞系(NIH/3T3、BALB/c-3T3、L929等) | 细胞库建库鉴定与长传代稳定性核查 | 染色体众数(2n=40±)、克隆变异率、标记染色体 | GB/T 21794-2025体外哺乳动物细胞中期相分析法 |
| 小鼠骨髓瘤及杂交瘤细胞(SP2/0-Ag14、NS-1及其融合株) | 单克隆抗体细胞株分泌稳定性评价 | 染色体丢失率、众数维持能力、结构畸变 | G显带核型分析+连续传代追踪 |
| 小鼠骨髓细胞与脾脏原代细胞 | 正常二倍体对照设置与实验本底核查 | 正常核型确认(2n=40,XY/XX) | GB/T 21772-2025哺乳动物骨髓细胞染色体制备法 |
| 冻存复苏后细胞样品 | 细胞冻存复苏质量与遗传稳定性评估 | 复苏后核型稳定性、众数偏移幅度 | 复苏培养1~2代后按中期相滴片法制备 |
检测项目
1. 染色体众数分析:每个样品计数50~100个分散良好的中期分裂相,正常小鼠细胞众数为2n=40,肿瘤细胞常见38~42近二倍体或55~80异倍体
2. 染色体数目畸变率:统计亚二倍体、超二倍体及多倍体细胞占比,结果精确至0.5%
3. 染色体结构畸变分析:观察100个中期相,记录断裂、缺失、易位、环状染色体、双着丝粒体等结构异常,检出水平约1%
4. G显带核型分析:GTG显带分辨率达320~550条带水平,可识别标记染色体与克隆性异常
5. DNA倍性指数测定:碘化丙啶染色结合流式分析,DNA指数DI 0.5~2.0,峰变异系数CV≤5%
检测范围
1. 腹水瘤细胞:S180肉瘤细胞、H22肝癌腹水型细胞、EAC艾氏腹水癌细胞等
2. 实体瘤来源细胞:Lewis肺癌细胞、4T1乳腺癌细胞、CT26结肠癌细胞、B16黑色素瘤细胞等
3. 成纤维细胞系:NIH/3T3、BALB/c-3T3、L929等小鼠源对照细胞系
4. 骨髓瘤与杂交瘤细胞:SP2/0-Ag14、NS-1骨髓瘤细胞及其杂交瘤融合子
5. 原代对照细胞:小鼠骨髓细胞、脾脏细胞等正常二倍体细胞(2n=40)
检测方法
1. GB/T 35823-2018 实验动物 动物实验通用要求
2. GB/T 35892-2018 实验动物 福利伦理审查指南
3. GB 14925-2023 实验动物 环境及设施
4. GB/T 21794-2025 化学品 体外哺乳动物细胞染色体畸变试验方法(中期相制备与核型观察)
5. GB/T 21772-2025 化学品 哺乳动物骨髓染色体畸变试验方法(骨髓对照细胞制片)
检测设备
1. 研究级生物显微镜(奥林巴斯BX53):配100×油镜(NA≥1.25)与高分辨率CMOS相机,用于中期相观察与显微成像
2. 自动核型扫描分析系统(蔡司Metafer 4):玻片自动扫描,支持中期相自动定位与核型排布
3. 二氧化碳培养箱(赛默飞371):温度37℃±0.3℃,CO2浓度5%±0.1%,用于细胞复苏与短时培养
4. 生物安全柜(二级A2型):工作区下降风速0.25~0.38m/s,保障原代样品处理生物安全
5. 高速台式离心机(艾本德5810R):转速100~15000rpm,温控范围-9~40℃
6. 恒温水浴锅:温度范围室温~100℃,控温精度±0.5℃,用于低渗处理
7. 组织解离仪(美天旎gentleMACS):程序化温和解离,用于实体瘤组织单细胞悬液制备
8. 流式细胞仪(BD FACSCanto II):配置488nm激光,DNA倍性分析峰CV≤3%
9. 超低温冰箱(-86℃):温度波动≤±5℃,用于细胞冻存
10. 电子分析天平(精度0.1mg):染色体分析试剂精确称量