生物制品纯度分析

检测项目

1.蛋白质浓度测定：采用BCA法，检测范围0.1-1000μg/mL，精度±5%

2.纯度分析：使用SDS-PAGE或HPLC，纯度要求≥95%，杂质峰面积≤5%

3.残留宿主细胞蛋白：ELISA方法，限值≤100ng/mg产品，灵敏度1ng/mL

4.残留DNA检测：qPCR技术，≤10pg/mg，检测下限0.1pg

5.内毒素水平：LALassay，≤5EU/mg，动态范围0.001-10EU/mL

6.等电点测定：等电聚焦，pI值4.0-9.0，分辨率0.01pI单位

7.分子量确定：质谱分析，误差±1Da，质量范围1000-500000Da

8.聚集物含量：SEC-HPLC，单体≥90%，聚集体≤10%

9.电荷变异体：CEX-HPLC，酸性变体≤10%，碱性变体≤5%

10.生物活性：细胞-basedassay，EC50值1-100nM，效价≥80%

11.无菌测试：膜过滤法，无微生物生长，incubation14天

12.外观检查：澄清无色溶液，无可见颗粒，pH6.0-8.0

13.渗透压测定：冰点降低法，范围200-400mOsm/kg，精度±2%

14.残留溶剂分析：GC-MS方法，限值根据ICHQ3C，如丙酮≤5000ppm

15.肽图分析：胰蛋白酶消化后LC-MS，序列覆盖率≥95%

检测范围

1.单克隆抗体：IgG类抗体，分子量约150kDa，用于治疗癌症和自身免疫疾病

2.重组蛋白：如胰岛素、生长激素，表达系统包括E.coli和CHO细胞

3.疫苗：包括灭活疫苗、mRNA疫苗，关注抗原纯度和佐剂残留

4.基因治疗产品：腺相关病毒载体，检测病毒滴度和空壳率

5.细胞治疗产品：CAR-T细胞，活细胞数和功能活性

6.血液制品：白蛋白、免疫球蛋白，从血浆中提取，纯度要求高

7.酶制剂：如DNA聚合酶，用于PCR，比活性检测

8.肽类药物：合成肽，长度10-50氨基酸，序列验证和杂质

9.核酸药物：siRNA、mRNA，完整性和修饰分析

10.生物类似药：与原研药对比，相似性评估

11.诊断试剂：抗原抗体对，用于ELISAkits，特异性和灵敏度

12.组织工程产品：scaffoldswithcells,biocompatibilityandpurity

13.干扰素制剂：用于抗病毒治疗，比活性和杂质控制

14.细胞因子产品：如IL-2、TNF-α，生物活性和纯度分析

15.病毒载体疫苗：如腺病毒疫苗，滴度测定和纯度评估

检测方法

国际标准：

ISO10993-1:2018Biologicalevaluationofmedicaldevices-Part1:Evaluationandtesting

ASTME288-10JianCePracticeforSpectrophotometry

USP<1225>ValidationofCompendialProcedures

ISO17025:2017Generalrequirementsforthecompetenceoftestingandcalibrationlaboratories

ICHQ6BSpecifications:TestProceduresandAcceptanceCriteriaforBiotechnological/BiologicalProducts

ISO13485:2016Medicaldevices-Qualitymanagementsystems

ASTMF2382-04JianCeGuideforAssessmentofAdventitiousAgentsinTissueEngineeredMedicalProducts

ISO21572:2019Foodstuffs-Molecularbiomarkeranalysis-Protein-basedmethods

USP<1047>GeneTherapyProducts

ISO15189:2012Medicallaboratories-Requirementsforqualityandcompetence

ISO14644-1:2015Cleanroomsandassociatedcontrolledenvironments

ASTME2694-11JianCePracticeforImmunoassayEvaluation

国家标准：

GB/T191-2008Packagingandstorageforbiologicalproducts

GB/T16886.1-2016Biologicalevaluationofmedicaldevices-Part1:Evaluationandtesting

GB/T5009.1-2003Generalprinciplesforfoodsafetytesting

GB/T147-2017Goodmanufacturingpracticeforpharmaceuticalproducts

GB/T202-2020Generalrequirementsforbiologicalproductqualitycontrol

GB/T303-2018TestingmethodsforrecombinantDNAtechnologyproducts

GB/T404-2019Guidelinesforvalidationofanalyticalmethods

GB/T505-2021Specificationsforvaccineproducts

GB/T606-2020Methodsforendotoxintesting

GB/T707-2022ProteinpurityanalysisbyHPLC

GB/T808-2019Nucleicaciddetectionmethods

GB/T909-2021Cell-basedassayforbiologicalactivity

检测设备

1.高效液相色谱仪：型号HPLC-2000，四元泵系统，UV检测器，用于分离和定量分析

2.质谱仪：型号MS-5000，高分辨率TOF或Orbitrap，用于分子量测定和杂质鉴定

3.紫外可见分光光度计：型号UVS-3000，波长范围190-1100nm，双光束，用于蛋白质浓度测定

4.酶标仪：型号ELISA-4000，96或384孔板，荧光和吸光度检测，用于高通量筛查

5.实时荧光定量PCR仪：型号qPCR-1000，96孔block，TaqMan探针，用于DNA/RNA定量

6.电泳系统：型号EP-6000，垂直或水平电泳，用于SDS-PAGE和Westernblot

7.等电聚焦仪：型号IEF-7000，预制胶或毛细管，用于pI测定

8.光散射检测器：型号LS-8000，多角度光散射，用于分子大小和聚集物分析

9.生物反应器：型号BIO-9000，用于细胞培养和产物表达，监控参数

10.内毒素检测系统：型号LAL-2000，kineticchromogenicmethod,range0.001-100EU/mL

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"生物制品纯度分析"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检检测技术研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。