检测项目

1. 病毒滴度测定：采用CCID50法测定疫苗中活病毒含量（≥6.5 lg CCID50/剂）

2. 无菌检查：依据《中国药典》通则1101进行需氧菌/厌氧菌及真菌培养（14天动态监测）

3. 外源病毒因子检测：包括细胞病变观察（CPE法）和血吸附试验（鸡红细胞吸附法）

4. 宿主细胞DNA残留量：荧光定量PCR法测定（≤10 ng/剂）

5. 牛血清白蛋白残留量：ELISA法检测（≤50 ng/剂）

检测范围

1. 猴肾细胞原代培养物及传代细胞基质

2. 疫苗病毒收获液及原液

3. 半成品疫苗混合液

4. 成品疫苗冻干制剂

5. 生产用辅料（如稳定剂、保护剂等）

检测方法

1. WHO TRS No.1024《脊髓灰质炎疫苗生产与质量控制》

2. 《中国药典》2020年版三部通则3301生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程

3. ISO 13408-6:2021《无菌药品生产第6部分：隔离器系统》

4. GB/T 34796-2017《动物细胞培养过程中支原体污染的检测方法》

5. ASTM E2888-19《病毒滴度测定的标准实施规程》

检测设备

1. BioTek Synergy H1多功能酶标仪：用于ELISA法蛋白残留分析

2. Applied Biosystems QuantStudio 5实时荧光定量PCR仪：宿主DNA定量检测

3. Eppendorf 5430R高速冷冻离心机：病毒颗粒分离（最大转速30,000×g）

4. Thermo Scientific Heracell 150i CO2培养箱：细胞培养（温度控制±0.1℃）

5. Millipore Milli-Q IQ7000超纯水系统：试剂配制用水（电阻率≥18.2 MΩ·cm）

6. Sartorius BIOSTAT B-DCU II生物反应器：细胞培养过程监控（pH/DO在线监测）

7. Olympus CKX53倒置显微镜：细胞形态学观察（400×相位差观察）

8. Agilent 1260 Infinity II HPLC系统：疫苗成分分析（C18色谱柱分离）

9. BD FACSCanto II流式细胞仪：细胞活力及凋亡检测（双激光六色配置）

10. Memmert INCO153细胞培养摇床：悬浮细胞培养（温度范围0-70℃±0.3℃）