检测项目

1.抗原含量测定：PT（百日咳毒素）≥20μg/mL，FHA（丝状血凝素）≥20μg/mL

2.效力试验：ED50值≤0.5mL（小鼠保护试验）

3.无菌检查：需氧菌/厌氧菌培养14天无生长

4.毒性物质检测：内毒素＜5EU/mL（鲎试剂法）

5.pH值测定：6.0-7.2（电位法0.05精度）

6.铝佐剂吸附率：≥85%（离心沉降法）

检测范围

1.全细胞百日咳疫苗原液及半成品

2.无细胞百日咳疫苗联合制剂（如DTaP）

3.铝佐剂（氢氧化铝/磷酸铝）悬浮体系

4.疫苗成品冻干粉针剂/预充式注射器

5.生产用培养基残留物（Stainer-Scholte培养基）

6.生物反应器培养残留蛋白（CHO细胞表达系统）

检测方法

1.WHOTRS_977Annex3：疫苗效力小鼠攻毒试验标准流程

2.EP10.0（欧洲药典）：抗原纯度SDS-PAGE电泳分析法

3.GB/T19146-2016：疫苗中铝含量原子吸收光谱测定法

4.FDA-CBER指南：流式细胞术检测宿主细胞DNA残留

5.CP2020（中国药典）：细菌内毒素动态浊度法测试规范

6.ISO11737-1：灭菌工艺验证的生物负载定量方法

检测设备

1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪：用于PT/FHA抗原定量分析

2.BioTekSynergyH1酶标仪：ELISA法测定抗体效价（450nm/630nm双波长）

3.MalvernZetasizerNanoZSP：佐剂粒径分布及Zeta电位测定

4.ThermoFisherOrbitrapExploris480质谱仪：蛋白质组学杂质鉴定

5.SartoriusBIOSTATSTR生物反应器：培养过程参数在线监测系统

6.MettlerToledoSevenExcellencepH计：高精度pH值测定（0.001）

7.BDFACSCantoII流式细胞仪：宿主细胞蛋白残留分析

8.ShimadzuAA-6880原子吸收光谱仪：铝离子含量定量检测

9.MemmertINCOmed培养箱：微生物限度检查恒温控制系统

10.PerkinElmerLambda365紫外分光光度计：核酸残留A260/A280比值测定