检测项目

1.生物活性测定：采用纤维蛋白平板法或发色底物法，活性范围需符合标示量的90%-120%

2.纯度分析：SDS-PAGE电泳法（纯度≥98%）及HPLC法（主峰面积≥95%）

3.宿主蛋白残留：ELISA法测定大肠杆菌宿主蛋白残留量≤0.1%

4.内毒素检测：凝胶法测定限值≤2.15EU/mg

5.DNA残留量：荧光定量PCR法控制≤10pg/mg

6.等电点测定：毛细管等电聚焦电泳法（pI范围6.8-7.2）

检测范围

1.重组葡激酶原料药（冻干粉末或溶液态）

2.注射用重组葡激酶制剂（含辅料配伍样品）

3.中间体产品（发酵液粗提物）

4.生物类似药对比研究样品

5.稳定性试验样品（加速/长期试验批次）

6.包材相容性试验样品（西林瓶/胶塞浸出物）

检测方法

1.中国药典2020版四部通则<生物制品活性测定指导原则>

2.ISO13485:2016《医疗器械质量管理体系》相关条款

3.GB/T16886.7-2015《医疗器械生物学评价第7部分：环氧乙烷灭菌残留量》

4.ASTME2694-16《紫外-可见分光光度计性能验证标准》

5.USP<85>细菌内毒素测试规范

6.GB/T34818-2017《重组蛋白制品中宿主细胞残留DNA测定法》

检测设备

1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱系统：用于分子量分布及纯度分析

2.ShimadzuUV-2600i紫外分光光度计：蛋白质浓度测定（A280nm法）

3.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：ELISA法宿主蛋白残留检测

4.WatersACQUITYUPLCH-Class超高效液相系统：肽图分析及杂质鉴定

5.MalvernZetasizerNanoZSP动态光散射仪：蛋白质聚集状态分析

6.Bio-RadChemiDocMP成像系统：SDS-PAGE电泳结果定量分析

7.EppendorfMastercyclerX50PCR仪：DNA残留量荧光定量检测

8.HettichRotina420R高速冷冻离心机：样品前处理分离操作

9.SartoriusCPA225D电子天平（0.01mg精度）：精密称量控制

10.LonzaEndosafeNexgen-PTS内毒素定量仪：动态显色法定量检测