肿瘤抑制核酸类药物检测

检测项目

纯度分析：

• 色谱纯度：主峰比例（≥98%，参照USP<621>液相色谱法）
• 杂质检测：最大单杂（≤0.5%），总杂（≤2.0%）
• 电泳纯度：片段大小一致性（偏差±2bp，参照ISO17025标准）

• 紫外分光光度法：吸光度A260值（浓度范围0.1-100μg/mL，精度±0.05μg/mL）
• 荧光定量法：Cy5标记检测（动态范围1pg-10ng，线性R²≥0.99）
• 质谱定量法：分子量确认（误差≤10ppm）

• 测序验证：碱基错误率（≤0.1%，参照IUPAC指南）
• 杂交效率：解链温度Tm值（偏差±1°C）
• 修饰位点检测：磷酸化/甲基化比例（目标值±5%）

• 热稳定性：降解速率（≤5%/月，40°C加速测试）
• 光稳定性：照度5000lux下变化率（≤10%）
• 冻融稳定性：循环3次活性保留（≥90%）

• 细胞抑制率：IC50值（参照NCI标准）
• 基因沉默效率：目标mRNA降低（≥80%）
• 凋亡诱导：caspase-3激活倍数（≥2倍）

• 内毒素：LAL法检测（≤0.25EU/mg）
• 重金属残留：铅/镉含量（≤10ppm，参照ICHQ3D）
• 溶剂残留：乙腈/DMSO（≤500ppm）

• 水溶性：溶解度值（mg/mL，pH7.4）
• 脂质相分配系数：logP值（-2至2范围）
• 胶体稳定性：粒径分散度（PDI≤0.2）

• 血清半衰期：t1/2值（≥30分钟）
• 酶降解率：核酸酶抗性（降解≤20%/h）
• 代谢产物分析：主要代谢物鉴定

• 包封效率：脂质纳米颗粒（≥95%）
• 释放动力学：体外释放率（24小时≥70%）
• 载体毒性：细胞存活率（≥85%）

• 急性毒性：LD50值（计算模型）
• 基因毒性：Ames试验（阴性结果）
• 免疫原性：细胞因子释放（IL-6≤50pg/mL）

检测范围

1.siRNA类药物：靶向特定肿瘤基因的短干扰RNA，重点检测沉默效率和脱靶效应

2.miRNA模拟物/抑制剂：调控microRNA表达的核酸药物，侧重序列特异性和细胞摄取率

3.反义寡核苷酸：单链DNA/RNA药物，核心检测杂交稳定性和核酸酶抗性

4.CRISPR-Cas9向导RNA：基因编辑组件，强调脱靶切割率和编辑效率验证

5.脂质纳米颗粒制剂：LNP包裹的核酸药物，关键检测包封完整性和粒径均匀性

6.聚合物纳米颗粒制剂：PEI或PLGA载体核酸，重点评估药物释放曲线和载体相容性

7.病毒载体核酸：AAV或慢病毒携带的基因治疗药物，侧重载体纯度和感染滴度

8.裸核酸药物：未修饰的游离核酸，核心检测溶解稳定性和体内分布

9.结合肽的核酸药物：肽-核酸缀合物，关键测试结合效率和靶向特异性

10.核酸适配体：靶向肿瘤标志物的适体，重点验证亲和力常数和结构稳定性

检测方法

国际标准：

• USP<621>核酸药物色谱纯度分析
• ISO17025核酸序列确证指南
• ICHQ2(R1)分析方法验证
• EP2.2.29寡核苷酸杂质检测
• ISO10993-5细胞毒性试验

• 中国药典2020版核酸类药物通则
• GB/T34800-2017核酸药物稳定性测试
• GB5009.74-2014重金属残留测定
• GB/T3723-1999内毒素检测方法
• GB/T16886-2017生物相容性评估

检测设备

1.高效液相色谱仪：Agilent1260InfinityII（检测波长254nm，分辨率0.1AU）

2.超高效液相色谱-质谱联用仪：WatersACQUITYUPLC-XevoTQ-S（质荷比范围50-2000m/z，精度±0.005Da）

3.毛细管电泳系统：BeckmanPA800Plus（电场强度300V/cm，分离时间≤20分钟）

4.实时荧光定量PCR仪：AppliedBiosystems7500Fast（动态范围0.01-100nM，循环数40）

5.纳米颗粒跟踪分析仪：MalvernNanoSightNS300（粒径范围10-2000nm，计数速率106/min）

6.细胞培养系统：ThermoFisherCO2培养箱（温度37°C±0.5°C，CO2浓度5%）

7.多功能酶标仪：BioTekSynergyH1（检测模式UV/VIS/荧光，波长范围200-1000nm）

8.三重四极杆质谱仪：SCIEXTripleQuad6500+（灵敏度fg/mL级，扫描速度50Hz）

9.核磁共振波谱仪：BrukerAvanceIIIHD（磁场强度600MHz，分辨率0.1Hz）

10.动态光散射仪：WyattDynaProNanoStar（角度范围15-165°，温度控制±0.1°C）

11.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（激光488nm/640nm，检测通道18）

12.稳定性试验箱：ESPECPR-3K（温度范围-40°C至+80°C，湿度10-98%RH）

13.生物反应器：SartoriusBIOSTATSTR（体积范围1-50L，搅拌速度50-500rpm）

14.超速离心机：BeckmanCoulterOptimaXPN-100（转速100000rpm，加速度500000g）

15.高通量基因测序仪：IlluminaNovaSeq6000（通量20TB/run，读长

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"肿瘤抑制核酸类药物检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。