


1. 核酸提取与纯化:样本基因组脱氧核糖核酸提取,脱氧核糖核酸浓度与纯度测定,去除聚合酶链式反应抑制剂。
2. 引物与探针设计验证:致死因子基因特异性引物筛选,荧光标记探针特异性验证,扩增效率与灵敏度评估。
3. 聚合酶链式反应体系建立:反应体系优化,引物与探针工作浓度确定,阳性对照与阴性对照设置。
4. 实时荧光定量聚合酶链式反应:靶基因扩增曲线分析,循环阈值判定,荧光信号实时监测。
5. 终点法聚合酶链式反应扩增:常规聚合酶链式反应扩增,扩增产物完整性验证。
6. 琼脂糖凝胶电泳分析:扩增产物片段大小分析,特异性条带鉴定,电泳图像判读。
7. 熔解曲线分析:扩增产物特异性验证,非特异性扩增与引物二聚体鉴别。
8. 测序验证:聚合酶链式反应产物纯化,基因序列测定,测序结果与数据库比对分析。
9. 灵敏度测试:检测下限确定,梯度稀释样本检测,拷贝数定量分析。
10. 特异性测试:近缘菌种交叉反应测试,人类基因组及其他常见微生物基因组干扰排除。
11. 重复性与再现性测试:批内重复检测,批间重复检测,不同操作人员间再现性验证。
12. 防污染措施验证:气溶胶污染监控,实验分区有效性验证,耗材无酶无脱氧核糖核酸认证。
13. 内参基因检测:内源性参照基因扩增,样本提取质量与聚合酶链式反应抑制情况监控。
14. 结果分析与判读:实验数据汇总,阴阳性结果判定标准应用,不确定度分析。
15. 检测报告编制:检测过程记录,结果客观陈述,结论规范性表述。
疑似患者血液标本、疑似患者组织液标本、疑似患者分泌物拭子、疑似患者痰液标本、环境土壤样本、环境水体样本、动物皮毛样本、动物组织样本、可疑白色粉末样本、空气气溶胶采样滤膜、实验室培养菌株、生物制品原材料、临床分离疑似菌株、疫源地环境介质、进口皮毛制品、饲料添加剂样本、食品安全监测样本、医疗废弃物样本、科研用生物材料、突发公共卫生事件现场采集物
1. 生物安全柜:为样本前处理及核酸提取提供无菌无污染的负压操作环境,防止病原微生物外泄及操作人员暴露。
2. 高速冷冻离心机:用于快速分离样本中的微生物细胞、沉淀核酸及纯化过程中的相分离,确保提取效率。
3. 核酸自动提取仪:基于磁珠法或柱式法原理,自动化完成细胞裂解、核酸结合、洗涤与洗脱步骤,提高提取通量和一致性。
4. 微量分光光度计:快速测定提取的脱氧核糖核酸浓度与纯度,通过吸光度比值评估蛋白质、盐离子等杂质残留情况。
5. 聚合酶链式反应仪:提供精准的温度循环控制,完成脱氧核糖核酸变性、退火与延伸的扩增过程,是基因扩增的核心设备。
6. 实时荧光定量聚合酶链式反应仪:在扩增过程中实时监测荧光信号变化,实现靶基因的定量与定性分析,具备高灵敏度和特异性。
7. 电泳系统:包含电泳槽与电源,用于琼脂糖凝胶电泳,根据分子量大小分离聚合酶链式反应产物,进行初步结果验证。
8. 凝胶成像分析系统:对电泳后的凝胶进行紫外或蓝光激发成像,捕获并分析脱氧核糖核酸条带的位置与亮度,辅助结果判读。
9. 超纯水系统:制备无核酶、无离子的超纯水,用于配置各种分子生物学试剂及反应体系,避免外来脱氧核糖核酸污染及酶活性抑制。
10. 测序仪:对聚合酶链式反应扩增产物进行双脱氧链终止法测序,获取精确的基因序列信息,用于最终结果的验证与毒力基因型分析。
报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。
检测周期:7~15工作日,可加急。
资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。
标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。
非标测试:支持定制化试验方案。
售后:报告终身可查,工程师1v1服务。
以上是与"炭疽杆菌致死因子基因测试"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检检测技术研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。
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