可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 外周血单个核细胞（PBMC） | 免疫功能研究、疫苗效果评价、细胞免疫状态监测等科研样本 | 淋巴细胞亚群比例与绝对数（T细胞、B细胞、NK细胞）、活化标志（CD69、CD25）、调节性T细胞比例 | WS/T 360-2024《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》；多色荧光抗体染色方案 |
| 间充质干细胞及细胞治疗用中间产品 | 细胞库放行质检、工艺开发、质量研究样品 | 表型鉴定（CD73、CD90、CD105阳性，CD45、CD34、CD14等阴性）、细胞纯度、细胞活率 | GB/T 39729-2020《细胞纯度测定 通用要求 流式细胞测定法》；国际细胞治疗学会（ISCT）间充质干细胞表型判读原则 |
| 培养细胞系（贴壁/悬浮） | 药物筛选、基因功能研究、细胞毒性评价 | 细胞凋亡率、细胞周期分布（G0/G1、S、G2/M期）、增殖活性 | Annexin V-FITC/PI双染色法；PI单染色DNA含量法 |
| 微藻与海洋微微型浮游生物 | 海洋生态调查、微藻培养工艺监控、水生态评估 | 微微型光合浮游生物丰度（聚球藻、原绿球藻、超微真核藻类） | GB/T 30737-2014《海洋微微型光合浮游生物的测定 流式细胞测定法》 |
| 生鲜乳及乳品加工原料 | 牧场质量分级研究、乳品原料质量控制 | 体细胞计数（SCC） | NY/T 800-2004《生鲜牛乳中体细胞的测定方法》（荧光流式原理计数仪器）；ISO 13366系列 |
| 细胞分选产物（荧光分选/磁珠分选） | 单细胞测序前质控、目标细胞富集工艺开发、稀有细胞富集 | 分选后纯度、回收率、磁珠结合效率 | GB/T 39730-2020《细胞计数 通用要求 流式细胞测定法》；GB/T 46661-2025《细胞分选用磁珠性能检测方法》 |
检测项目
1. 细胞计数与活率：线性计数范围10³~10⁷ cells/mL，计数重复性CV≤5%，活率判定常用7-AAD、DAPI等膜完整性染料
2. 细胞纯度测定：目标细胞群比例要求≥95%~99%，按GB/T 39729-2020规定的门控与判定流程执行
3. 细胞凋亡检测：Annexin V-FITC/PI双染色四象限法，区分早期凋亡、晚期凋亡与坏死，比例读数分辨至0.1%
4. 细胞周期分析：PI单染色测定DNA含量，G0/G1、S、G2/M三相比例，G1峰CV≤8%为仪器分辨率要求
5. 免疫表型分析：CD分子多色标记可达12色以上，T/B/NK亚群给出相对比例与绝对计数（cells/μL）
检测范围
1. 免疫细胞：外周血单个核细胞、T淋巴细胞、NK细胞、巨噬细胞等原代免疫细胞
2. 干细胞与衍生细胞：脐带、骨髓、脂肪来源间充质干细胞及诱导多能干细胞（iPSC）衍生细胞
3. 培养细胞系：HEK293、CHO、HeLa等贴壁或悬浮培养的工程细胞与肿瘤细胞系
4. 微型藻类：聚球藻、原绿球藻、微囊藻等淡水与海洋微藻
5. 分选产物：磁珠分选阳性细胞、荧光分选GFP报告细胞等目标富集细胞群
检测方法
1. GB/T 39730-2020 细胞计数 通用要求 流式细胞测定法
2. GB/T 39729-2020 细胞纯度测定 通用要求 流式细胞测定法
3. GB/T 46661-2025 细胞分选用磁珠性能检测方法
4. GB/T 30737-2014 海洋微微型光合浮游生物的测定 流式细胞测定法
5. WS/T 360-2024 流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南
6. NY/T 800-2004 生鲜牛乳中体细胞的测定方法
检测设备
1. 分析型流式细胞仪：配置3激光及以上，荧光通道14色以上，采样速度≥10000 events/s
2. 流式细胞分选仪：70μm/100μm喷嘴可选，纯化模式分选纯度≥98%
3. 磁珠分选系统：配套分选柱与磁极架，支持CD4、CD8、CD34等直选分选
4. 自动细胞计数仪：明场与荧光双通道，计数范围1×10⁴~1×10⁷ cells/mL
5. 倒置生物显微镜：4×~40×相差物镜，配数码成像系统用于样品状态核对
6. 荧光显微镜：LED三色激发，配DAPI、FITC、PE滤光块用于染色效果核查
7. 低温离心机：4℃控温，转速100~5000r/min，水平转子减少细胞损伤
8. CO₂培养箱：温度37℃±0.2℃，CO₂浓度5%±0.1%，维持样品活性
9. 生物安全柜：二级A2型，工作区洁净度达ISO 5级，保障无菌操作