药品抗肿瘤活性分析

检测项目

细胞毒活性检测：

• MTT法：IC₅₀值（参照NCI-60指南），治疗指数（TI≥3）
• 集落形成抑制：克隆形成率（≤40%为有效）
• LDH释放检测：细胞膜损伤率（≥对照组200%）

增殖抑制分析：

• EdU掺入法：DNA合成抑制率（流式细胞术检测）
• Ki-67免疫荧光：增殖指数下降率（≥50%）

细胞周期分析：

• PI染色流式检测：G0/G1期阻滞（比例≥60%），G2/M期阻滞（比例≥25%）
• Cyclin依赖性激酶活性：CDK4/6抑制率（ELISA法）

凋亡检测：

• AnnexinV/PI双染：早期凋亡率（≥15%），晚期凋亡率（≥10%）
• Caspase-3/7活性：酶活升高倍数（≥2倍）
• TUNEL检测：DNA碎片化阳性率（≥20%）

迁移侵袭抑制：

• Transwell小室：迁移抑制率（≥50%），基质胶侵袭抑制率（≥60%）
• 伤口愈合实验：迁移速度下降率（≥40%）

血管生成抑制：

• HUVEC管腔形成：管状结构数量（≤对照组30%）
• VEGF分泌量：ELISA检测浓度（≤100pg/mL）

信号通路分析：

• WesternBlot：p-AKT/AKT比值（下降≥50%），p-ERK/ERK比值（下降≥40%）
• 磷酸化蛋白芯片：≥3条通路关键节点抑制

耐药性评价：

• P-gp外排泵功能：罗丹明123蓄积量（流式检测）
• ABC转运蛋白表达：qPCR检测mRNA上调倍数（≤2倍）

免疫调节活性：

• T细胞活化标志：CD69+细胞比例（≥25%）
• PD-L1表达抑制：流式检测阳性率（≤对照组50%）

代谢分析：

• 糖酵解通量：乳酸生成量（≤对照组70%）
• 线粒体膜电位：JC-1红绿荧光比（下降≥30%）

检测范围

1.化学合成药物：小分子激酶抑制剂（EGFR/VEGFR抑制剂）、DNA损伤剂（铂类化合物），重点检测靶点结合率及选择性指数

2.植物提取物：紫杉醇类、喜树碱类生物碱，侧重多药耐药逆转能力及联合用药协同指数

3.生物制剂：单克隆抗体（PD-1/PD-L1抑制剂）、ADC药物，要求检测Fc段介导的ADCC/CDC效应强度

4.基因治疗载体：CRISPR-Cas9基因编辑系统、溶瘤病毒，验证肿瘤细胞特异性杀伤及脱靶效应

5.天然产物：海洋肽类化合物、真菌多糖，需完成NF-κB通路抑制及免疫细胞激活双验证

6.纳米制剂：脂质体阿霉素、白蛋白紫杉醇，核心检测药物释放动力学及EPR效应增强率

7.中药复方：华蟾素注射液、复方苦参注射液，需进行多组分协同效应分析及HPLC指纹图谱关联

8.多肽药物：RGD靶向肽、细胞穿膜肽，重点验证肿瘤组织靶向积累效率（活体成像）

9.海洋生物活性物质：海鞘素衍生物、藻类多糖，要求检测端粒酶活性抑制（TRAP法）

10.免疫检查点抑制剂：CTLA-4/PD-1双抗，需完成T细胞耗竭逆转率及免疫记忆形成检测

检测方法

国际标准：

• NCI-CTCAE5.0抗肿瘤药物毒性评价指南
• ISO10993-5:2009医疗器械细胞毒性测试
• ASTME2526-22纳米材料细胞毒性标准
• CLSIM27-A3抗真菌药物敏感性试验（适用于抗肿瘤药物交叉验证）

国家标准：

• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验
• YY/T1462-2016抗肿瘤药物药效学评价技术指导原则
• ChP20201101细胞毒性检查法
• GB/T27818-2011化学品体外哺乳动物细胞转化试验方法

方法差异说明：ISO10993-5采用MTT法时要求≥70%细胞存活率为合格，而GB/T16886.5规定≥80%；NCI指南要求IC₅₀重复实验变异系数≤15%，YY/T1462要求≤20%

检测设备

1.流式细胞仪：BDFACSCelesta（激光配置488nm/640nm，检测灵敏度≤100FITC分子）

2.高内涵成像系统：PerkinElmerOperaPhenix（水镜60×NA1.1，Z轴分辨率0.5μm）

3.实时细胞分析仪：ACEAxCELLigenceRTCADP（阻抗检测范围1-10⁶细胞/孔）

4.激光共聚焦显微镜：LeicaTCSSP8STED（分辨率突破衍射极限至30nm）

5.全自动酶标仪：BioTekSynergyH1（光吸收精度±0.005OD，温控精度±0.1℃）

6.活细胞工作站：OlympusIXploreLive（CO₂控制精度±0.1%，湿度维持≥95%）

7.超高效液相色谱：WatersACQUITYUPLCH-Class（压力范围0-18,000psi）

8.质谱流式系统：FluidigmHelios（同时检测＞40种金属标签抗体）

9.小动物活体成像仪：PerkinElmerIVISLuminaIII（灵敏度达0.5pM荧光素酶）

10.显微操作注射系统：EppendorfTransferMan4m（定位精度0.05μm）

11.三维细胞培养系统：SyntheconRCCS-4DQ（转速控制0-25rpm±0.1rpm）

12.电转染仪：BTXECM830（脉冲参数0-3000V可调）

13.全自动斑马鱼检测平台：ViewPointZebrabox（运动轨迹追踪精度0.02mm）

14.微流控芯片系统：EmulateOrgan-Chip（流体剪切力范围0-60dyne/cm²）

15.单细胞测序仪：10xGenomicsChromiumX（通量＞100,000细胞/次）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"药品抗肿瘤活性分析"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。