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蛋白质微粒诱发IgE介导超敏反应试验

  • 原创官网
  • 2025-07-28 10:51:38
  • 关键字:北检研究院,蛋白质微粒诱发IgE介导超敏反应试验

相关:

概述:本试验聚焦蛋白质微粒诱导的IgE介导超敏反应检测,核心包括微粒致敏原鉴定(如分子量、表位分析)、IgE抗体亲和力测定及效应细胞(肥大细胞、嗜碱性粒细胞)脱颗粒反应。通过定量组胺、类胰蛋白酶释放及细胞因子表达,评估过敏反应强度和潜在风险。适用于食品、环境微粒和生物制品的安全评估,旨在预测人类过敏原致敏性阈值和临床相关性。

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注意:因业务调整,暂不接受个人委托测试,望谅解(高校、研究所等性质的个人除外).

因篇幅原因,CMA/CNAS证书以及未列出的项目/样品,请咨询在线工程师。

☌ 询价

检测项目

过敏原特性分析:

  • 分子量测定:SDS-PAGE迁移率(参照ISO21415)、表位覆盖率(≥95%)
  • 表位映射:线性表位数量(ELISA抑制法)、构象表位稳定性(变性耐受指数)
IgE结合检测:
  • 抗体亲和力:解离常数(Kd值≤10^-8M,SPR法)、特异性结合率(≥80%)
  • 交叉反应测试:同源蛋白相似性(序列同源性≥70%)、抑制率(ELISA法)
细胞反应评估:
  • 肥大细胞脱颗粒:组胺释放量(≥50ng/mL)、类胰蛋白酶浓度(ELISA检测限0.1ng/mL)
  • 嗜碱性粒细胞激活:CD63表达率(流式细胞术≥20%)、CD203c上调倍数
介质释放定量:
  • 组胺水平:HPLC-MS/MS浓度(检测限0.01ng/mL)、释放动力学曲线
  • 细胞因子检测:IL-4、IL-13表达量(RT-qPCRCt值≤25)
基因表达分析:
  • 信号通路激活:NF-κB磷酸化率(Westernblot灰度比值)、STAT6mRNA表达
  • 炎症因子转录:TNF-α、IL-5mRNA水平(foldchange≥2.0)
动物模型测试:
  • 被动皮肤过敏:PCA评分(0-4级,参照OECD406)、水肿体积变化
  • 全身反应评估:体温降幅(≥1°C)、症状严重度分级
体外替代试验:
  • 嗜碱性粒细胞活化:BAT阳性率(≥15%)、激活阈值(EC50值)
  • 皮肤等效模型:组织水肿指数(H&E染色分析)、屏障功能损伤
稳定性测试:
  • 热稳定性:变性温度(Td≥60°C)、活性残留率(≥90%)
  • pH耐受性:最佳pH范围(5.0-8.0)、失活率(≤10%)
交叉反应分析:
  • 过敏原家族比对:保守区域相似性(BLASTE值≤0.01)、交叉抑制效率
  • 多物种反应:血清池反应率(≥50%)
风险评估:
  • 致敏阈值:EC50浓度(≤10μg/mL)、临床相关性评分(0-10级)
  • 安全性指数:无反应剂量(NOEL值)、风险概率模型

检测范围

1.食品源性微粒:包括花生、牛奶、鸡蛋蛋白提取物,重点检测致敏原纯度和IgE结合能力。

2.环境微粒:涵盖花粉、尘螨、霉菌提取物,侧重粒径分布和免疫原性强度。

3.医药产品:涉及疫苗佐剂、抗体药物,评估过敏性杂质残留和细胞反应阈值。

4.化妆品成分:如植物提取物、酶制剂,监控潜在致敏风险和介质释放水平。

5.工业材料:包括乳胶手套、酶清洗剂,检测蛋白质残留致敏性和稳定性。

6.转基因生物:新表达蛋白样本,安全性焦点为交叉反应和动物模型评估。

7.饲料添加剂:动物源蛋白微粒,重点分析致敏原浓度和体外替代测试。

8.空气悬浮微粒:PM2.5蛋白组分,侧重健康风险评估和基因表达分析。

9.水处理残渣:藻类、细菌蛋白,检测致敏潜力和介质释放定量。

10.临床诊断样本:血清IgE抗体,应用重点是过敏原特异性和交叉反应测试。

检测方法

国际标准:

  • ISO10993-10医疗器械致敏反应生物学评价方法
  • OECDTG406皮肤致敏性体内试验
  • ISO21415谷物蛋白分子量测定法
  • AOAC992.28食品过敏原ELISA检测
  • ASTMF2721生物材料脱颗粒试验
国家标准:
  • GB/T16886.10医疗器械生物学评价过敏试验
  • GB5009.XXX食品中过敏原蛋白检测
  • GB/T39145化妆品皮肤致敏性试验方法
  • GB/T39201环境颗粒物生物学效应评价
  • GB/T29867体外替代过敏试验规范
方法差异说明:国际标准如ISO10993-10强调体外细胞模型,而GB/T16886.10整合动物模型;OECDTG406要求豚鼠试验,GB/T39145优化为小鼠模型;AOAC992.28使用多克隆抗体,GB5009.XXX优先单克隆抗体检测限差异。

检测设备

1.流式细胞仪:FACSCantoII型(检测通道≥8,荧光灵敏度0.1MESF)

2.ELISA阅读器:ELx800型(吸光度范围0-4.0OD,精度±0.005)

3.HPLC系统:1260Infinity型(色谱柱C18,检测限0.1ng/mL)

4.质谱仪:QExactive型(分辨率140,000,质量精度±1ppm)

5.PCR仪:7500型(热循环速度≤2°C/s,荧光检测通道≥5)

6.细胞培养箱:Forma311型(温度范围30-40°C,CO2控制±0.1%)

7.显微镜:BX53型(放大倍数10×-100×,数字成像分辨率4K)

8.离心机:5430R型(转速100-15,000rpm,温度控制±0.5°C)

9.光谱仪:NanodropOne型(样品量1μL,波长范围190-850nm)

10.微板洗板机:405TS型(洗板精度CV≤3%,兼容96/384孔)

11.电泳系统:Mini-PROTEAN型(电压范围50-300V,凝胶厚度1.0mm)

12.成像分析仪:ChemiDoc型(CCD分辨率5MP,动态范围4OD)

13.温控摇床:Innova44型(转速20-300rpm,温度精度±0.2°C)

14.超低温冰箱:JianCeT型(温度-80°C,容积≥500L)

15.生物安全柜:ClassII型(气流速度0.3m/s,HEPA过滤≥99.99%)

北检(北京)检测技术研究院【简称:北检院】

报告:可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期:7~15工作日,可加急。

资质:旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试:严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试:支持定制化试验方案。

售后:报告终身可查,工程师1v1服务。

以上是与"蛋白质微粒诱发IgE介导超敏反应试验"相关的简单介绍,具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。

    材料检测服务

    专业分析各类金属、非金属材料的成分、结构与性能,提供全面检测报告和解决方案。包括金属材料力学性能测试、高分子材料老化试验、复合材料界面分析等。

    化工产品分析

    精准检测各类化工产品的成分、纯度及物理化学性质,确保产品质量符合国家标准。服务涵盖有机溶剂分析、催化剂表征、高分子材料分子量测定等。

    环境检测服务

    提供土壤、水质、气体等环境检测服务,助力环境保护与污染治理,共建绿色家园。包括VOCs检测、重金属污染分析、水质生物毒性测试等。

    科研检测认证

    凭借专业团队和先进设备,致力于为企业研发、质量控制及市场准入提供精准可靠的技术支撑,助力品质提升与合规发展。