生物类似药免疫原性对比测试

检测项目

免疫原性评估：

• 抗药抗体检测：发生率(%)、滴度（log2，参照EMA/CHMP/14327/2006）
• 中和抗体测定：阳性率(%)、抑制效率（IC50，nM）
• 免疫复合物分析：形成速率（%/h）、稳定性（小时）

细胞学测试：

• T细胞增殖：刺激指数（SI≥2.0）、细胞计数（个/mL）
• 细胞因子释放：IL-6水平（pg/mL）、TNF-α浓度（pg/mL）
• 吞噬作用评估：吞噬率(%)、吞噬指数

结合活性分析：

• 抗原结合亲和力：KD值（nM）、kon/koff速率（1/M·s）
• 交叉反应测试：特异性评分（0-10）、假阳性率(%)
• 受体占据率：结合百分比(%)、解离常数

功能活性比较：

• 生物活性分析：相对效力(%)、EC50值（nM）
• 信号传导效率：磷酸化水平（倍数变化）、通路激活（%)
• 酶动力学：Vmax（μM/min）、Km（μM）

风险评估指标：

• 免疫原性风险等级：评分（1-5级）、概率(%)
• 临床相关性：不良反应发生率(%)、严重程度（等级）
• 长期安全性：累计风险指数

药代动力学参数：

• 清除率：mL/h/kg、分布容积（L/kg）
• 半衰期：小时、峰值浓度（μg/mL）
• 生物利用度：相对百分比(%)

生物分布监测：

• 组织分布：浓度（μg/g）、滞留时间（天）
• 代谢产物分析：降解产物水平(%)、稳定性（月）
• 排泄途径：清除百分比(%)

安全药理学测试：

• 心脏毒性：QT间期延长（ms）、心率变化（bpm）
• 呼吸功能：呼吸频率（次/分）、氧饱和度(%)
• 神经毒性：行为评分（等级）

毒理学评估：

• 急性毒性：LD50（mg/kg）、最大耐受剂量
• 遗传毒性：突变频率、染色体畸变率(%)
• 免疫毒性：器官指数、炎症评分

稳定性验证：

• 降解产物检测：杂质水平(%)、氧化比例(%)
• 效力保持：相对活性(%)、保质期（月）
• 储存条件影响：温度敏感性（°C）、湿度耐受(%)

检测范围

1.单克隆抗体类似药：涵盖利妥昔单抗类似物等，重点检测中和抗体形成和细胞因子风暴风险

2.融合蛋白类似药：包括依那西普类似物，侧重受体结合亲和力差异和免疫复合物稳定性

3.胰岛素类似药：针对长效和速效胰岛素，核心检测抗胰岛素抗体发生率和药代动力学参数

4.生长因子类似药：如EPO类似物，突出信号传导效率评估和增殖活性比较

5.疫苗类似药：涉及HPV疫苗类似物，重点检测抗体应答强度和交叉反应特异性

6.酶替代疗法类似药：如GAA酶类似物，聚焦抑制剂产生检测和功能活性保留

7.肽类类似药：包括GLP-1类似物，核心评估T细胞激活和免疫原性风险等级

8.核酸类似药：如siRNA类似物，侧重先天免疫反应监测和细胞因子释放水平

9.细胞疗法类似药：涵盖CAR-T类似物，重点检测宿主抗移植物反应和细胞毒性

10.血液制品类似药：如凝血因子类似物，突出过敏反应风险评估和清除率变化

检测方法

国际标准：

• ICHS6(R1)生物技术产品临床前安全性评价
• EMA/CHMP/BMWP/14327/2006免疫原性评价指南
• USP<1032>生物制品免疫原性试验设计
• ISO10993-22医疗器械免疫毒性测试

国家标准：

• 中国药典2020年版三部生物制品免疫原性试验
• GB/T生物制品稳定性试验指导原则
• GB免疫学检测方法通用要求
• YY/T医药产品免疫原性评价规范

（方法差异说明：ICH与GB在样本量要求不同，ICH推荐≥50样本，GB建议≥30；EMA与USP在抗体检测灵敏度标准差异，EMA要求≤1ng/mL，USP为≤5ng/mL；ISO与YY/T在细胞毒性测试中温度控制范围不同，ISO为37±0.5°C，YY/T为37±1°C）

检测设备

1.流式细胞仪：BDFACSCelesta型（检测灵敏度：100事件/秒，激光波长488nm）

2.ELISA读数仪：BioTekSynergyH1型（波长范围：200-999nm，精度±0.01OD）

3.质谱仪：Agilent6495C型（分辨率：60,000，质量精度±1ppm）

4.实时PCR仪：ThermoFisherQuantStudio6型（温度精度±0.1°C，通量：384孔）

5.细胞培养箱：ThermoScientificHeracell150i型（CO2控制±0.1%，温度范围4-50°C）

6.高通量筛选系统：PerkinElmerEnVision型（读板速度：1秒/孔，检测通道：5个）

7.倒置显微镜：LeicaDMi8型（放大倍数：1000x，分辨率0.2μm）

8.生物分析仪：Agilent2100型（样本通量：12个/运行，芯片精度±2%）

9.高速离心机：Eppendorf5430R型（最大转速：15,000rpm，温度控制±1°C）

10.冷冻干燥机：LabconcoFreeZone型（温度范围：-50°C至室温，真空度：0.05mbar）

11.恒温水浴槽：MemmertWNB14型（温度稳定性±0.1°C，容量：14L）

12.电泳系统：Bio-RadMini-PROTEAN型（电压范围：10-300V，凝胶尺寸：8x10cm）

13.超高效液相色谱仪：WatersACQUITYUPLC型（流量精度±0.1%，压力上限15000psi）

14.自动取样器：GilsonGX-271型（位置精度±0.1mm，样本容量：96位）

15.数据处理工作站：定制分析软件型（分析速度：1000样本/分钟，兼容性：多平台）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

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