生物制药车间微生物分析

检测项目

空气微生物监测：

• 浮游菌计数：CFU/m³（采样流量100L/min，参照ISO14698-1）
• 沉降菌测试：CFU/皿（暴露时间4h，ISO14698-1）
• 粒子计数与微生物相关性：≥0.5μm颗粒数/m³（ISO14644-1）

• 总需氧菌计数：CFU/mL（检测限≤10CFU/100mL，USP<61>）
• 霉菌和酵母检测：CFU/mL（培养温度25±2°C）
• 内毒素测试：限值≤0.25EU/mL（动态显色法，USP<85>）

• 接触碟法：CFU/皿（接触面积25cm²，参照FDAGuidance）
• 拭子采样：CFU/cm²（回收率≥80%，ISO18593）
• 生物负荷评估：菌落形成单位（CFU）偏差（±15%）

• 最终产品微生物限度：CFU/g或mL（USP<61>）
• 无菌检查：无生长（14天培养，USP<71>）
• 快速微生物方法：结果时间≤24h（PCR技术）

• 洁净区级别确认：A级区浮游菌≤1CFU/m³（ISO14644-1）
• 数据统计：警戒限（ActionLimit）设置（±2SD）
• 异常事件调查：根源分析报告（RCA）

• 菌种分型：16SrRNA测序（准确度≥99%）
• 革兰氏染色：阳性/阴性判定（参照Bergey'sManual）
• 耐药性测试：最小抑制浓度（MIC，μg/mL）

• 促生长能力：回收率≥70%（USP<61>）
• 无菌性检查：无污染（14天培养）
• pH稳定性：7.2±0.2（储存期验证）

• ATP生物发光：RLU阈值（检测限≤10CFU）
• 流式细胞术：活菌计数（精度±5%）
• 核酸扩增：检测限≤1CFU（qPCR技术）

• 杀菌率：log10减少值≥3（接触时间10min）
• 残留验证：无毒性（细胞毒性试验）
• 兼容性：材料腐蚀评估（ASTMG31）

• 芽孢存活计数：CFU/载体（参照ISO11138）
• D值测定：分钟（湿热灭菌）
• Z值计算：温度系数（℃）

检测范围

1.洁净室空气：覆盖A级至D级洁净区，重点检测浮游菌和沉降菌浓度，评估HVAC系统效能与污染风险。

2.注射用水（WFI）：检测总需氧菌、内毒素和电导率，确保USP<1231>合规性，重点关注蒸馏或RO系统输出水质。

3.设备表面（不锈钢材质）：包括反应罐、管道和阀门，采用接触碟或拭子法，监测清洁后生物负荷残留，预防交叉污染。

4.生物制药最终产品：如单抗或疫苗，执行无菌测试和微生物限度，验证灌装工艺完整性，符合21CFRPart211。

5.原材料（培养基和缓冲液）：筛查细菌和真菌污染，检测pH和渗透压，确保支持细胞培养的微生物安全性。

6.洁净服和防护装备：评估纤维表面微生物负载，采样点包括袖口和帽沿，监控人员操作污染源。

7.生物反应器内容物：在线监测细胞培养液，检测总菌落和内毒素，控制发酵过程无菌环境。

8.包装材料（玻璃西林瓶）：针对内表面微生物测试，包括颗粒物和生物膜，确保终端灭菌合规性。

9.工艺气体（压缩空气）：：过滤后采样，测定油分和微生物含量，参照ISO8573-7标准，保障无污染供应。

10.清洁验证样品：来自CIP系统残留水，检测微生物限度，确认清洁剂有效性，防止生物膜形成。

检测方法

国际标准：

• ISO14698-1:2003洁净室微生物控制（采样方法差异：沉降菌暴露时间固定）
• USP<61>非无菌产品微生物计数（培养温度25-30°C）
• USP<71>无菌检查（培养基类型差异）
• ISO11737-1:2018灭菌生物负载评估（回收率校正要求）
• EP2.6.1细菌内毒素测试（动态显色法vs凝胶法）

• GB/T16292-2010医药工业洁净室悬浮粒子测试（粒子尺寸分级差异）
• GB/T14233.2-2005输液器具微生物检查（采样体积限制）
• 中华人民共和国药典2020版四部（内毒素限值标准差异）
• GB4789.2-2016食品微生物检验（适用范围扩展）
• GB/T19973.1-2015医疗器械微生物方法（生物指示剂验证差异）

检测设备

1.浮游菌采样器：SASSuper180型（流量180L/min，精度±5%）

2.膜过滤系统：MilliporeExpressPlus型（孔径0.45μm，真空度≥85kPa）

3.生化培养箱：MemmertINC108型（温度范围10-70°C，均匀度±0.5°C）

4.内毒素检测仪：EndosafePTS型（检测限0.001EU/mL，动态范围0.005-50EU/mL）

5.PCR扩增仪：QuantStudio5型（热循环速度≤1°C/s，通道数96）

6.自动菌落计数器：Scan500型（分辨率5μm，计数误差≤2%）

7.流式细胞仪：BDAccuriC6型（流速14μL/min，荧光通道4个）

8.ATP生物发光仪：HygienaEnSure型（灵敏度1fmolATP，响应时间10s）

9.洁净工作台：LabconcoPurifier型（风速0.45m/s，HEPA过滤效率99.99%）

10.离心机：Eppendorf5424型（转速6000rpm，容量24×1.5mL）

11.显微镜：OlympusCX43型（放大倍数40-1000X，LED光源）

12.水分活度仪：RotronicHC2型（范围0-1aw，精度±0.01）

13.生物安全柜：NuAireNU-437型（气流模式垂直层流，噪声≤65dB）

14.灭菌釜：Tuttnauer3870型（温度范围105-135°C，压力0.22MPa）

15.电导率仪：MettlerToledoSevenExcellence型（范围0-200mS/cm，分辨率0.01μS/cm）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"生物制药车间微生物分析"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。