检测项目

细胞毒性检测：

• 细胞存活率测定：IC50值（半数抑制浓度，参照ISO10993-5）、LD50值（半数致死剂量）
• 凋亡分析：凋亡细胞百分比（≥20%为阳性）、caspase活性（单位：RFU）

• 表面等离子共振：Kd值（解离常数，≤10nM为高亲和力）、kon/koff速率（参照Biacore标准）
• 免疫共沉淀：结合效率（%）、非特异性结合率（≤5%）

• RT-qPCR检测：基因表达倍数变化（FC≥2为显著）、Ct值（循环阈值）
• RNA测序：差异表达基因数量（参数：p值<0.05）

• 磷酸化水平测定：磷酸化蛋白丰度（单位：OD值）、信号通路激活率（%）
• 激酶抑制检测：IC50值（参照ICHS7B）、选择性指数（SI≥10）

• CYP450抑制：抑制率（%，≥50%为阳性）、代谢半衰期（t1/2，小时）
• 体外肝微粒体试验：清除率（CLint，mL/min/kg）

• 高通量结合试验：脱靶蛋白数量（参数：≥3个）、结合亲和力（Kd值）
• 细胞表型分析：形态变化评分（1-5级）

• T细胞活化检测：CD69表达率（%）、细胞因子释放（IL-2浓度，pg/mL）
• 巨噬细胞吞噬试验：吞噬指数（PI≥1.5）

• AUC测定：曲线下面积（ng·h/mL）、Cmax值（峰值浓度）
• 生物利用度计算：F值（%，≥80%为高）

• 最大耐受剂量：MTD值（mg/kg）、临床症状评分（0-4级）
• 组织病理学分析：器官损伤指数（参数：0-3级）

• 致癌性评估：肿瘤发生率（%）、潜伏期（天）
• 生殖毒性测试：胚胎畸形率（≤5%）

检测范围

1.小分子激酶抑制剂：涵盖EGFR、VEGFR等靶点药物，重点检测脱靶激酶抑制及代谢稳定性

2.单克隆抗体药物：抗PD-1/PD-L1等免疫检查点抑制剂，侧重Fc受体结合及免疫原性风险

3.抗体药物偶联物：ADC类药物如Trastuzumabemtansine，检测接头稳定性及脱靶细胞毒性

4.肽类靶向药物：包括Somatostatin类似物，聚焦蛋白水解稳定性及非特异性结合

5.siRNA药物：RNA干扰制剂，重点评估脱靶基因沉默及免疫刺激效应

6.miRNA抑制剂：反义寡核苷酸类药物，检测非目标miRNA影响及细胞摄取效率

7.疫苗类肿瘤药物：癌症疫苗如Neoantigen疫苗，侧重T细胞活化脱靶及自身免疫反应

8.细胞治疗产品：CAR-T细胞疗法，重点检测脱靶细胞杀伤及细胞因子释放综合征风险

9.基因治疗载体：AAV或Lentiviral载体，聚焦载体整合脱靶及插入突变概率

10.纳米药物递送系统：脂质体或聚合物纳米粒，检测非特异性组织积累及炎症反应

检测方法

国际标准：

• ICHS7B安全药理学研究
• ISO10993-5体外细胞毒性试验
• OECDTG471细菌回复突变试验
• FDAGuidance免疫原性评估

• 中国药典2020版通则9012药物杂质检查
• GB/T16886.5-2017医疗器械生物学评价
• YY/T0127.14-2009细胞毒性试验方法

检测设备

1.流式细胞仪：BDFACSCantoII（检测速度：10,000细胞/秒，荧光通道：8个）

2.表面等离子共振仪：BiacoreT200（灵敏度：0.1RU，流速范围：1-100μL/min）

3.质谱仪：ThermoQExactive（分辨率：140,000FWHM，质量精度：<2ppm）

4.高通量筛选系统：PerkinElmerEnVision（通量：1536孔板，检测波长：200-700nm）

5.实时荧光定量PCR仪：RocheLightCycler480（温度精度：±0.1°C，通道数：6个）

6.酶标仪：BioTekSynergyH1（检测模式：吸光/荧光/发光，波长范围：200-999nm）

7.液相色谱仪：Agilent1260Infinity（流速：0.001-10mL/min，压力限：600bar）

8.细胞成像系统：OlympusIX83（分辨率：0.2μm，放大倍数：40-1000×）

9.动物活体成像系统：PerkinElmerIVISLumina（灵敏度：1pM，视野：20cm×20cm）

10.冷冻电镜：ThermoGlacios（加速电压：200kV，分辨率：2Å）

11.核磁共振仪：BrukerAvanceIII（磁场强度：600MHz，探头：5mm）

12.X射线衍射仪：RigakuSmartLab（角度范围：-110°至+168°，精度：0.0001°）

13.生物反应器：SartoriusBiostatB（容量：1-20L，控制参数：pH/DO/温度）

14.毒性测试仪：HamiltonMicrolabStar（加样精度：±0.5μL，通量：96孔板）

15.气相色谱仪：ShimadzuGC-2010Plus（柱温范围：室温至450°C，检测限：0.1ppb）