检测项目
1.药物-抗体比（DAR）测定：采用UV-Vis光谱法测定偶联效率，DAR值范围2.8-3.5
2.游离毒素残留量：LC-MS/MS法检测MMAE浓度≤0.1μg/mL
3.纯度分析：SEC-HPLC法测定单体纯度≥95%，聚集体≤5%
4.效价测定：基于NCI-N87细胞系的体外细胞毒性试验（IC50≤10nM）
5.内毒素检测：鲎试剂法测定内毒素含量＜5EU/mg
6.无菌检查：薄膜过滤法培养14天符合无菌要求
7.可见异物检查：灯检法符合《中国药典》0904通则
检测范围
1.原料药：包括单克隆抗体、细胞毒性药物MMAE及连接子
2.中间体：偶联反应液、纯化中间体及缓冲液体系
3.成品制剂：冻干粉针剂及复溶后溶液
4.包装材料：西林瓶、胶塞及铝盖的密封完整性
5.稳定性样品：加速试验（40℃/75%RH）及长期试验（25℃/60%RH）样品
6.工艺残留物：TritonX-100、Polysorbate80等去污剂残留
检测方法
1.DAR值测定：参照《中国药典》2020年版四部通则0401紫外-可见分光光度法
2.纯度分析：执行USP<621>色谱法通则及EP2.2.29SEC-HPLC标准
3.微生物限度：依据USP<61>/<62>微生物学检验标准
4.内毒素检测：符合GB/T14233.2-2005医用输液器具检验方法
5.残留溶剂：采用GB/T5750.8-2023顶空气相色谱法
6.效价测定：参照ISO17025认可的细胞培养实验室操作规范
检测设备
1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪：配备BioSEC-5色谱柱（4.6300mm），用于分子量分布分析
2.WatersXevoTQ-S三重四极杆质谱仪：LC-MS/MS系统定量分析MMAE残留
3.MalvernZetasizerNanoZS90动态光散射仪：测定粒径分布（PDI＜0.15）
4.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：细胞毒性试验OD值测定
5.SartoriusCPA225D电子天平（0.01mg精度）：精密称量对照品
6.EscoAirstreamClassII生物安全柜：无菌操作环境保障
7.MemmertHPP750恒温恒湿箱：稳定性试验条件控制（0.5℃）
8.ShimadzuUV-2600i紫外分光光度计：DAR值快速筛查（波长280/252nm）
9.MilliporeMilli-QIQ7000超纯水系统：提供18.2MΩcm实验用水
10.SartoriusStedimBiotech微生物检测系统：集菌培养一体化工作站