检测项目

1.病毒滴度测定：采用细胞病变法（CPE）检测活病毒含量≥6.5lgCCID50/mL

2.残余水分分析：卡氏库仑法测定冻干品含水量≤3.0%（w/w）

3.无菌检查：薄膜过滤法培养14天无微生物生长

4.热稳定性试验：37℃加速试验7天病毒滴度下降≤1.0lg

5.异常毒性试验：豚鼠腹腔注射0.5mL无异常反应

6.宿主细胞蛋白残留：ELISA法测定≤50ng/剂

7.pH值测定：电位法控制范围6.8-7.8

检测范围

1.疫苗原液：病毒培养液纯化后的中间产物

2.半成品：冻干前配制的混合液体制剂

3.成品冻干粉：铝盖密封西林瓶装冻干制剂

4.辅料成分：蔗糖、明胶等冻干保护剂纯度检测

5.包装材料：西林瓶密封性及胶塞可提取物分析

6.生产用水：注射用水内毒素水平≤0.25EU/mL

检测方法

1.GB/T40172-2021《生物制品病毒滴度测定通则》

2.ISO8536-4:2016《医用输液器具第4部分：冷冻干燥机》

3.《中国药典》2020年版四部通则1101无菌检查法

4.WHOTRSNo.978Annex3《疫苗热稳定性评估指南》

5.ASTME2694-21《库仑法测定水分标准方法》

6.GB/T14233.2-2005《医用输液器具检验方法第2部分：生物试验》

检测设备

1.BSL-2级生物安全柜（ThermoScientific1300系列）：病毒操作防护设备

2.全自动细胞计数仪（NexcelomCellometerX4）：Vero细胞密度监测

3.高效液相色谱仪（Agilent1260InfinityII）：宿主蛋白残留分析

4.冷冻干燥机（LabconcoFreeZone12L）：冻干工艺参数验证设备

5.实时荧光定量PCR仪（RocheLightCycler480）：外源病毒核酸筛查

6.全自动微生物培养系统（BDBACTECFX40）：无菌检查培养监测

7.卡氏水分测定仪（MettlerToledoC30S）：残余水分精密分析

8.恒温恒湿箱（MemmertHPP750）：加速稳定性试验设备

9.pH计（METTLERTOLEDOSevenExcellence）：制剂pH值精确测量

10.激光粒度分析仪（MalvernMastersizer3000）：冻干粉复溶粒径分布检测