检测项目
1.插入位点序列分析:覆盖500bp侧翼区域碱基对数目≥99%,同源性匹配率≥98%
2.拷贝数定量检测:灵敏度达0.1拷贝/细胞级,动态范围10^1-10^6
3.整合方向验证:双酶切位点验证准确率≥99.9%
4.甲基化状态分析:CpG岛覆盖率≥95%,分辨率达单碱基水平
5.表达稳定性测试:连续传代20次后表达量波动≤5%
检测范围
1.转基因作物:水稻Os基因座、玉米ZmGos2启动子区等
2.重组蛋白药物:CHO细胞GS基因座、HEK293细胞AAVS1位点
3.基因编辑细胞系:CRISPR/Cas9介导的HBB、CCR5等靶点
4.功能化纳米材料:金纳米颗粒表面配体接枝位点
5.生物传感器:荧光报告基因插入rRNA操纵子区
检测方法
1.反向PCR扩增(GB/T38569-2020)结合IlluminaMiSeq测序
2.数字PCR定量(ISO20395:2019)使用Bio-RadQX200系统
3.Southernblot杂交(GB/T19495.4-2018)采用DIG标记探针
4.全基因组重测序(ASTME3136-18)平均深度≥30
5.Hi-C染色体构象捕获(ISO/TS20914:2019)分辨率达10kb
检测设备
1.IlluminaNovaSeq6000:高通量双通道测序仪,通量6Tb/run
2.ThermoFisherQuantStudio7Pro:96孔实时定量PCR系统
3.Agilent4200TapeStation:DNA完整性检测(DIN≥7.0)
4.BeckmanCoulterCytoFLEXS:流式细胞分选仪(488/640nm双激光)
5.OxfordNanoporeGridIONX5:长读长测序(N50>20kb)
6.CovarisM220:超声破碎仪(DNA片段化150-800bp)
7.BioNanoSaphyr:光学图谱系统(DNA分子长度>250kb)
8.PerkinElmerLabChipGXTouch:核酸定量精度5%
9.RocheLightCycler480II:多重PCR扩增效率>90%
10.PacBioSequelIIe:HiFireads准确率Q30>99.9%