检测项目

1.纯度测定：采用HPLC法测定目标蛋白含量≥98%，SEC-HPLC分析聚集体比例≤2%

2.生物活性分析：基于TF-1细胞增殖试验的ED50值（0.1-10ng/mL），ELISA法验证结合活性

3.内毒素检测：鲎试剂法（LAL）测定限值＜0.1EU/mg

4.宿主蛋白残留：CHO宿主细胞蛋白残留量≤100ppm（ELISA法）

5.核酸残留：qPCR法测定DNA残留≤10ng/mg

6.等电点分析：毛细管等电聚焦电泳（cIEF）测定pI值偏差0.2

检测范围

1.CHO细胞表达的重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）

2.大肠杆菌表达的重组人表皮生长因子（rhEGF）

3.HEK293细胞生产的重组人干扰素γ（rhIFN-γ）

4.哺乳动物细胞培养上清液中的干细胞因子（SCF）

5.冻干制剂中的重组人促红细胞生成素（rhEPO）

6.预充式注射器中的聚乙二醇化IL-2衍生物

检测方法

1.中国药典2020版四部通则<3121>生物活性测定法

2.ISO17025:2017实验室管理体系规范

3.ASTME2694-21标准对流式细胞术的要求

4.GB/T34818-2017重组蛋白制品质量评价指南

5.USP<85>细菌内毒素测试规范

6.EP2.6.14Prekallikreinactivator测定方法

检测设备

1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备BioSEC-5色谱柱（4.6300mm），用于分子量分布分析

2.WatersXevoTQ-Smicro三重四极杆质谱仪：精确测定分子量（误差0.01%）及肽图分析

3.MalvernZetasizerPro动态光散射仪：测量粒径分布（0.3nm-10μm）与Zeta电位

4.BDFACSCantoII流式细胞仪：配备488/640nm双激光器，完成细胞表面受体结合率测试

5.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：支持UV-Vis/荧光/化学发光多模式检测

6.BeckmanCoulterPA800plus药物分析系统：毛细管电泳法测定电荷异质性

7.LonzaWinKQCL微生物快速检测系统：符合21CFRPart11的内毒素定量分析

8.EppendorfBioSpectrometeradvanced核酸蛋白分析仪：A280法快速定量浓度（0.02-375mg/mL）