检测项目

1.纯度分析：采用SEC-HPLC法测定单体含量≥98%，RP-HPLC法测定总纯度≥95%

2.生物学活性：基于WISH细胞/VSV病毒抑制法测定比活性≥110^6IU/mg

3.残留宿主DNA：荧光定量PCR法检测≤10ng/剂量（LOQ=0.1pg/μL）

4.内毒素含量：动态显色法测定≤0.1EU/mg（符合USP<85>要求）

5.二级结构表征：圆二色谱法测定α-螺旋含量≥60%（波长190-260nm）

检测范围

1.重组集成干扰素α原液（BulkDrugSubstance）

2.冻干粉针剂（LyophilizedPowderforInjection）

3.预充式注射器制剂（PrefilledSyringeFormulations）

4.生物类似药中间体（BiosimilarIntermediateProducts）

5.稳定性研究样品（加速/长期储存条件样品）

检测方法

1.SDS-PAGE法：GB/T41365-2022测定分子量及条带纯度

2.ELISA法：ISO13485:2016测定残留宿主蛋白（HCP≤100ppm）

3.肽图分析：ChP2020通则3401进行胰酶消化LC-MS鉴定

4.紫外扫描法：ASTME275-08测定A280/A260比值≥1.7

5.微生物限度：GB/T14233.2-2005薄膜过滤法培养14天

检测设备

1.高效液相色谱仪（Agilent1260InfinityII）：配备BioSEC-5色谱柱（4.6300mm），用于分子排阻色谱分析

2.全自动酶标仪（BioTekSynergyH1）：支持动力学荧光扫描（λex=360nm/λem=460nm）

3.实时荧光定量PCR仪（ABIQuantStudio7）：TaqMan探针法检测残留DNA

4.圆二色光谱仪（JascoJ-1500）：配备PTC-423L温控单元进行构象分析

5.UPLC-QTOF质谱系统（WatersXevoG2-XS）：ESI源正离子模式采集质谱数据

6.激光粒度分析仪（MalvernMastersizer3000）：干法测量粒径分布D90≤100μm

7.全自动细菌内毒素检测仪（CharlesRiverEndosafeNexgen-PTS）：动态显色法定量分析

8.多功能电泳系统（Bio-RadChemiDocMP）：ImageLab软件进行凝胶图像分析