检测项目

1.蛋白质浓度测定：采用紫外分光光度法（A280/A260）与BCA法双系统验证，浓度范围0.1-2.0mg/mL

2.生物活性测定：基于NIH/3T3细胞增殖实验（MTT法），效价标准≥110^5IU/mg

3.纯度分析：RP-HPLC（C18柱）测定单体纯度≥98%，SEC-HPLC测定聚集体含量≤2%

4.内毒素检测：动态显色法鲎试剂（LAL）测试限值≤10EU/mg

5.宿主蛋白残留：ELISA法测定CHO细胞蛋白残留量≤100ppm

检测范围

1.冻干粉制剂：注射用重组bFGF原料药及成品

2.液体剂型：预充式注射器与西林瓶装无菌溶液

3.复合制剂：含透明质酸的缓释凝胶载体系统

4.医疗器械涂层：骨修复材料表面改性涂层

5.细胞培养基：GMP级无血清培养添加组分

检测方法

1.生物活性：ISO10993-5细胞毒性试验结合USP<1034>生物测定指导原则

2.纯度分析：GB/T33410-2016《重组蛋白纯度测定反相高效液相色谱法》

3.残留DNA：GB/T34796-2017《核酸残留量测定荧光染色法》

4.等电点测定：IEC-HPLC参照《中国药典》2020年版四部通则0541

5.微生物限度：GB/T14233.2-2005医用输液器具检验方法第2部分

检测设备

1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱系统：配备DAD检测器与ChemStation工作站，用于纯度及杂质分析

2.MolecularDevicesSpectraMaxi3x多功能酶标仪：支持MTT/CCK-8法细胞增殖动力学测试

3.MalvernZetasizerNanoZS90纳米粒度仪：Zeta电位及粒径分布（PDI≤0.25）测定

4.WatersACQUITYUPLCH-Class超高效液相色谱系统：用于痕量杂质（LOQ=0.01%）检测

5.ShimadzuUV-2600i紫外可见分光光度计：A280/A260比值法快速定量

6.EndosafeNexgen-PTS内毒素定量仪：0.001-50EU/mL动态显色法检测

7.EppendorfMastercyclerX50实时荧光定量PCR仪：宿主DNA残留定量（灵敏度≤10pg/mL）

8.ThermoScientificOrbitrapExploris480质谱仪：分子量确证（误差≤50ppm）及肽图分析

9.MettlerToledoSevenExcellencepH计：精密电化学参数测量（分辨率0.001pH）

10.SartoriusCPA225D电子天平：百万分之一级称量精度（d=0.01mg）