检测项目
1.第因子促凝活性(FVIII:C)测定:采用一期法/发色底物法,测量范围0.5-200IU/dL
2.第因子抗原含量(FVIII:Ag)分析:ELISA法定量检测,灵敏度≥0.1IU/mL
3.热稳定性测试:37℃孵育0/2/4小时后的活性保留率≥80%
4.抑制剂筛查:Bethesda法测定抑制物滴度(≥0.6BU为阳性)
5.高分子量多聚体分析:凝胶电泳法测定多聚体比例(正常值>85%)
检测范围
1.人血浆源性凝血因子浓缩制剂
2.重组DNA技术生产的FVIII药品
3.体外诊断试剂盒校准品/质控品
4.血友病A患者术前凝血功能评估样本
5.生物制品生产中间体纯度验证
检测方法
1.ASTMF2384-10《血浆制品凝血活性测定标准指南》
2.ISO17025:2017《医学实验室凝血试验技术要求》
3.GB/T19106-2013《冻干人凝血因子Ⅷ制剂》质量规范
4.CLSIH48-A《凝血因子活性测定指南》
5.EP7.0欧洲药典第7版第0778章FVIII专论
检测设备
1.ACLTOP750LAS全自动凝血分析仪:光学磁珠法测FVIII:C
2.Agilent1260InfinityIIHPLC:多聚体分离(色谱柱ZORBAXGF-450)
3.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪:FVIII:Ag定量分析
4.Bio-RadModel680微板洗板机:ELISA实验清洗控制
5.MemmertINCO153恒温培养箱:稳定性测试温控0.3℃
6.WatersACQUITYUPLCH-Class系统:糖基化修饰分析
7.BeckmanCoulterAU5800生化分析仪:辅因子结合能力测试
8.MalvernPanalyticalZetasizerPro:动态光散射测粒径分布