检测项目

1.多糖含量测定：采用苯酚-硫酸法（波长490nm）或HPLC-CAD法（色谱柱TSKgelG5000PWxl），定量范围5-200μg/mL

2.分子量分布分析：SEC-MALS联用系统（WyattDAWNHELEOSII），测量范围10kDa-2000kDa

3.O-乙酰基含量检测：分光光度法（波长520nm）或HPAEC-PAD法（DionexICS-5000+）

4.蛋白质残留量：BCA法（562nm）或ELISA（抗TT/DT抗体灵敏度≤1ng/mL）

5.内毒素检测：鲎试剂凝胶法（灵敏度0.03EU/mL）或动态显色法（EndosafeNexgen-PTS）

检测范围

1.23价肺炎球菌纯化多糖原料（血清型1/3/4/5/6B等）

2.结合疫苗载体蛋白（破伤风类毒素TT/白喉类毒素DT）

3.半成品疫苗原液（多糖-蛋白结合物）

4.成品西林瓶制剂（冻干粉针剂/预充式注射剂）

5.生产辅料（磷酸铝佐剂/蔗糖稳定剂）

检测方法

WHOTRS977Annex2《肺炎球菌结合疫苗质量要求》

EP10.0Chapter2.7.18《多糖分子量测定》

USP<1233>《疫苗生物活性测定》

ChP2020通则3101《多糖疫苗鉴别试验》

GB/T35834-2018《疫苗中残留抗生素检测》

检测设备

1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪：配备示差折光/RID检测器（G7162A），用于多糖定量分析

2.WyattDAWNHELEOSII多角度激光光散射仪：18角度检测器（λ=658nm），联用SEC柱进行绝对分子量测定

3.MalvernZetasizerNanoZSP：动态光散射模块（测量范围0.3nm-10μm），用于粒径分布及Zeta电位分析

4.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：双通道滤光片系统（波长范围340-850nm），支持ELISA及BCA法检测

5.ShimadzuTOC-L总有机碳分析仪：高温催化氧化法（检测限0.001mg/L），用于清洁验证

6.EndosafeNexgen-PTS内毒素快速检测系统：动态显色法（0.005-50EU/mL），15分钟完成定量测试

7.DionexICS-5000+离子色谱系统：脉冲安培检测器（金工作电极），用于O-乙酰基定量分析

8.SartoriusCPA225D电子天平：称量范围220g/0.01mg，符合GLP规范称量操作

9.MemmertINCOmed培养箱：温度范围+5℃至60℃（波动度0.3℃），用于无菌检查培养

10.Agilent7890B气相色谱仪：配备FID检测器（灵敏度≤1pgC/s），用于残留溶剂分析