宠物湿粮大肠杆菌试验

检测项目

1.大肠杆菌定性检测：目标菌落特征为金属光泽绿色菌落，检测限1CFU/25g样品

2.大肠埃希氏菌计数：VRBA培养基计数，范围0-10⁹CFU/g，精度±5%

3.耐热大肠菌群测定：44.5℃培养24h，阳性管产气即为阳性

4.O157:H7血清型鉴定：特异性抗原检测，包括O157脂多糖和H7鞭毛抗原

5.VT1/VT2毒素基因检测：PCR扩增，引物序列针对vt1(384bp)和vt2(285bp)基因片段

6.β-葡萄糖醛酸酶试验：MUG培养基荧光反应，波长365nm紫外观察

7.靛基质试验：色氨酸代谢检测，阳性反应呈玫瑰红色

8.甲基红试验：葡萄糖代谢产物检测，pH≤4.2时呈红色

9.V-P试验：乙酰甲基甲醇检测，阳性反应呈橘红色

10.柠檬酸盐利用试验：西蒙氏培养基，阳性菌落呈普鲁士蓝色

11.抗生素敏感性测试：包括氨苄青霉素(10μg)、四环素(30μg)等16种药物

12.生物被膜形成能力：结晶紫染色法，OD595nm≥0.5为强阳性

13.溶血活性检测：血平板培养，观察α/β/γ溶血现象

14.耐酸性测试：pH2.5缓冲液处理2h，存活率≥50%为耐酸菌株

15.热耐受性检测：60℃水浴处理30min，计算D值及Z值

检测范围

1.禽类主食湿粮：鸡肉、火鸡、鸭肉为主要蛋白来源的膏状产品

2.红肉配方湿粮：牛肉、羊肉含量≥30%的肉酱型食品

3.鱼类配方湿粮：金枪鱼、三文鱼等海鲜基质，含水量78-85%

4.肝脏类湿粮：动物肝脏含量20-50%的高营养密度产品

5.幼宠专用湿粮：颗粒尺寸≤5mm的慕斯状或肉泥状食品

6.处方类流质食品：针对疾病宠物的营养补充剂，粘度150-300cP

7.零食类肉糜：水分活性aw≥0.97的奖励性食品

8.有机认证湿粮：不含防腐剂的天然配方产品

9.多口味混合湿粮：含谷物、蔬菜等复合配方的肉块型产品

10.出口专用湿粮：符合欧盟/美国进口标准的灭菌产品

11.常温保存湿粮：马口铁罐装，商业无菌要求产品

12.冷藏鲜粮：巴氏杀菌(72℃/15s)的短保质期产品

13.功能性湿粮：添加益生元、维生素等活性成分的产品

14.液态营养补充剂：蛋白质含量5-8%的流质食品

15.宠物奶制品：乳基湿粮，乳糖含量≤0.1%的低敏配方

检测方法

国际标准：

ISO16654:2001食品和动物饲料微生物学-大肠杆菌O157检测水平方法

ISO7251:2005食品和动物饲料微生物学-推定大肠埃希氏菌计数技术

ISO21871:2006食品和动物饲料微生物学-潜在产肠毒素大肠杆菌检测

ISO6579-1:2017微生物学-食物链微生物学-沙门氏菌检测参考方法

ASTMF2751-11宠物食品微生物检测指南

FDABAMChapter4A:2018大肠埃希氏菌O157:H7检测

USDAMLG5.09:2021生肉制品大肠杆菌计数方法

APHA966.24:2015食品微生物学标准方法-大肠菌群检测

AOAC966.24:2005食品中大肠杆菌官方分析方法

ENISO6888-1:2021葡萄球菌凝固酶阳性菌计数

国家标准：

GB4789.38-2021食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数

GB4789.6-2016食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验

GB4789.36-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验

GB4789.3-2016食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数

GB14939.2-2018宠物食品卫生标准微生物指标

GB/T28642-2012饲料中大肠杆菌O157:H7的快速检测方法

GB/T22409-2008宠物食品微生物检验通则

GB13078-2017饲料卫生标准

GB/T30956-2014宠物食品中微生物的测定

GB4789.28-2013食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂质量要求

检测设备

1.全自动微生物定量系统：型号BacT-8000.检测范围0.1-1000CFU/g，通量200样/批

2.实时荧光PCR仪：型号qPCR-9600.检测灵敏度10拷贝/反应，支持多重靶标检测

3.微生物鉴定质谱仪：型号MALDI-TOFMS.数据库含2000+菌株图谱，鉴定准确率≥95%

4.全自动酶标分析仪：型号ELx800.波长范围400-750nm，支持96/384孔板

5.生物安全柜：型号BSC-1500ⅡA2.HEPA过滤器效率99.99%，风速0.35±0.05m/s

6.恒温培养箱：型号INC-300.温度范围4-65℃，精度±0.5℃，容积300L

7.微生物过滤系统：型号MF-100.滤膜孔径0.45μm，直径47mm

8.全自动菌落计数仪：型号Scan500.分辨率5μm，计数速度＜10秒/平板

9.电泳仪系统：型号EPS-600.电压范围50-500V，最大电流400mA

10.微生物快速检测仪：型号RDS-210.基于阻抗原理，检测时间缩短至18-24h

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"宠物湿粮大肠杆菌试验"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检检测技术研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。