检测项目
1.RNA完整性指数（RIN）：通过电泳迁移率评估28S/18SrRNA比值（≥7.0合格）
2.逆转录效率验证：使用spike-in对照基因计算Ct值偏移（允许偏差1.5cycles）
3.非靶标扩增率：阴性对照样本中非特异性产物阈值（≤35个拷贝/μL）
4.引物二聚体形成率：熔解曲线分析Tm值偏移（ΔTm≤1.5℃）
5.转录本定量线性：标准曲线R值验证（≥0.98为有效）
检测范围
1.基因治疗载体：AAV载体、慢病毒载体中的转基因mRNA
2.疫苗原料：mRNA疫苗原液中的修饰核苷酸比例
3.体外诊断试剂：PCR试剂盒中的逆转录酶活性单位
4.细胞治疗产品：CAR-T细胞中嵌合抗原受体mRNA拷贝数
5.生物样本库：冻存组织样本的RNA降解速率（每年降解率≤5%）
检测方法
1.ISO20395:2019生物技术-核酸定量方法验证要求
2.ASTME3027-18RNA测序文库制备标准指南
3.GB/T37872-2019核酸扩增法检测试剂盒质量评价
4.ISO/IEC17025:2017检测实验室通用要求
5.GB/T34796-2017核酸浓度测定通则（紫外分光光度法）
检测设备
1.Agilent2100Bioanalyzer：执行RNA完整性芯片分析（灵敏度0.1ng/μL）
2.ThermoFisherQuantStudio6Pro：实时监测逆转录扩增效率
3.NanoDropOneC微量分光光度计：测定RNA纯度（A260/A280≥1.8）
4.RocheLightCycler480II：执行高分辨率熔解曲线分析
5.IlluminaNovaSeq6000：进行全转录组测序验证
6.QIAGENRotor-GeneQ：多重荧光定量PCR检测
7.BeckmanCoulterCytoFLEX：流式细胞术验证表面蛋白表达
8.Bio-RadCFX96Touch：数字PCR绝对定量分析
9.EppendorfMastercyclerX50s：梯度PCR扩增系统
10.PerkinElmerLabChipGXII：自动化电泳质控平台