检测项目

1.外观检查：溶液颜色（Y6标准比色液）、澄清度（0.5级浊度标准液）、可见异物（≥50μm微粒数≤3个/支）

2.pH值测定：5.0-6.5范围内波动值≤0.1

3.蛋白质含量：SEC-HPLC法测定主峰面积≥98%，UV280nm法浓度偏差≤5%

4.无菌检查：薄膜过滤法培养14天阴性对照

5.内毒素检测：鲎试剂凝胶法限值≤0.5EU/mg

6.效价测定：基于CTLL-2细胞增殖抑制法的相对活性≥90%

7.残留宿主蛋白：ELISA法≤100ng/剂

检测范围

1.原液：活性成分浓度（80-120mg/mL）、聚集体比例（SEC法≤2%）

2.辅料：甘露醇含量（HPLC-ELSD法3%）、吐温80残留（GC-FID法≤0.01%）

3.包装材料：西林瓶可提取物（UPLC-QTOF法）、胶塞硅油涂层厚度（SEM法10-30nm）

4.中间产品：除菌过滤前生物负载（≤10CFU/100mL）、灌装精度（1%）

5.成品制剂：氧化修饰率（CE-SDS法≤5%）、亚可见微粒（≥10μm≤6000粒/支）

检测方法

1.生物活性测定：参照USP<1034>细胞培养法及GB/T34818-2017标准

2.纯度分析：执行EP2.2.46毛细管电泳法和ChP2020四部通则0512

3.残留DNA检测：按ISO13022:2012实时荧光定量PCR法

4.重金属检测：采用GB/T5009.74-2014原子吸收光谱法

5.稳定性试验：依据ICHQ1A(R2)加速试验条件40℃/75%RH六个月

检测设备

1.高效液相色谱仪（Agilent1260InfinityII）：配备BioSEC-5色谱柱（4.6300mm），用于分子量分布分析

2.紫外可见分光光度计（ShimadzuUV-2600i）：波长精度0.1nm，执行蛋白质A280定量

3.流式细胞仪（BDFACSCantoII）：配置488nm激光器，完成细胞结合活性测试

4.电感耦合等离子体质谱仪（PerkinElmerNexION350D）：检出限达ppt级重金属分析

5.全自动微生物培养系统（bioMrieuxBACT/ALERT3D）：支持双温度层析培养监测

6.动态光散射仪（MalvernZetasizerNanoZS）：测量粒径分布（PDI＜0.15）

7.超高效液相色谱仪（WatersACQUITYUPLCH-Class）：配备BEH300C4柱（1.7μm），完成肽图分析

8.冷冻干燥机（MillrockREVO）：控温精度0.5℃，用于冻干品水分测定（KF法≤3%）