心血管药物致敏性测试

检测项目

皮肤致敏性测试：

• 局部淋巴结试验：刺激指数（SI≥3）、淋巴细胞增殖率（参照OECD429）
• Buehler试验：致敏评分（0-4级）、红斑水肿程度
• 人皮肤模型测试：IL-18释放量（≥50pg/mL）

眼刺激性测试：

• Draize眼刺激试验：角膜浑浊度（0-4级）、结膜充血评分（参照OECD405）
• 体外角膜模型：细胞存活率（≥70%）
• 荧光素染色法：上皮损伤面积（mm²）

细胞毒性评估：

• MTT法：IC50值（μg/mL）、细胞活力（≥80%）
• LDH释放试验：酶活性（U/L）、坏死细胞比例
• 膜完整性检测：钙离子内流量（nM）

基因毒性测试：

• Ames试验：回复突变率（TA98、TA100菌株≥2倍）、参照OECD471
• 染色体畸变试验：畸变细胞率（≤5%）、微核形成频率
• 彗星试验：DNA损伤指数（尾距≥20μm）

免疫原性分析：

• ELISA法：IgE抗体滴度（≥1:100）、补体激活水平
• 流式细胞术：T细胞活化比例（CD69+≥10%）
• 嗜碱性粒细胞脱颗粒试验：组胺释放量（ng/mL）

过敏反应监测：

• 被动皮肤过敏试验：蓝斑直径（mm）、血管通透性变化
• 主动全身过敏试验：过敏症状评分（0-3级）、死亡率（≤10%）
• 呼吸道致敏模型：气道阻力增加率（%）

药代动力学相关测试：

• 血浆蛋白结合率：结合率（≥90%）、游离药物浓度（平衡透析法）
• 代谢物分析：代谢产物比例（HPLC-MS检测）、半衰期（t1/2≥2h）
• 组织分布研究：药物蓄积量（μg/g组织）

皮肤渗透性测试：

• Franz扩散池法：渗透速率（μg/cm²/h）、稳态通量
• 角质层屏障评估：经皮失水量（g/m²/h）、屏障功能指数
• 离体皮肤模型：药物滞留量（ng/mg）

炎症反应评估：

• 细胞因子释放试验：IL-6水平（pg/mL）、TNF-α浓度（参照LPS刺激）
• 中性粒细胞趋化试验：迁移距离（μm）、趋化因子表达
• 巨噬细胞活化：吞噬指数（≥1.5）

系统毒性评估：

• 急性毒性试验：LD50值（mg/kg）、临床观察评分
• 亚慢性毒性研究：器官重量变化（±10%）、28天暴露指标
• 血液学分析：白细胞计数（×10⁹/L）、血小板聚集率

检测范围

1.口服固体剂型（片剂/胶囊）：检测重点在胃肠道吸收后系统性致敏反应，评估药物代谢物致敏性及肠黏膜屏障影响

2.注射用溶液（静脉/肌肉注射液）：检测重点在注射部位局部炎症、全身过敏风险及血管内皮细胞激活

3.透皮贴剂：检测重点在皮肤接触致敏性、渗透屏障破坏及长期贴敷引起的慢性炎症

4.眼用制剂（滴眼液/眼膏）：检测重点在角膜结膜刺激、局部免疫应答及眼表过敏症状

5.鼻喷剂：检测重点在呼吸道黏膜致敏、鼻腔上皮细胞毒性及吸入性过敏原模拟

6.植入式医疗器械涂层药物：检测重点在长期组织接触致敏、异物反应及涂层降解产物免疫原性

7.儿科心血管药物：检测重点在年龄相关敏感性差异、发育毒性及低剂量致敏阈值

8.老年用药制剂：检测重点在多药相互作用致敏风险、免疫衰老影响及肝肾代谢负荷

9.生物类似药（单抗/重组蛋白）：检测重点在免疫原性比较、蛋白聚集体致敏及交叉反应性

10.复方制剂（多成分组合）：检测重点在成分间相互作用致敏性、协同效应及杂质影响

检测方法

国际标准：

• OECD429:2022皮肤致敏局部淋巴结试验方法
• ISO10993-10:2021医疗器械致敏性评价指南
• ICHS6(R1)生物技术药物临床前安全性试验
• OECD471:2020细菌回复突变试验标准
• ISO10993-5:2018医疗器械细胞毒性测试方法

国家标准：

• ChP2020四部生物制品致敏性检查法
• GB/T16886.10-2017医疗器械生物学评价致敏试验
• YY/T0127-2018医药包装材料细胞毒性检测
• GB/T16886.5-2017医疗器械体外细胞毒性试验
• ChP2020二部化学药品杂质检测通则

方法差异说明：OECD标准强调体外替代方法如LLNA，而ChP和GB标准更侧重体内试验如豚鼠最大化试验；ISO10993-10要求综合评估皮肤刺激和致敏，GB/T16886.10则细化到医疗器械具体应用；ICHS6(R1)针对生物药免疫原性，ChP标准涵盖传统化学药杂质致敏风险

检测设备

1.流式细胞仪：BDFACSAriaIII（检测灵敏度0.01%细胞亚群）

2.酶标仪：BioTekSynergyH1（波长范围200-1000nm，精度±0.01OD）

3.液相色谱质谱联用仪：Agilent6495C（质量精度1ppm，流速范围0.1-2mL/min）

4.倒置显微镜：OlympusIX83（放大倍数1000x，分辨率0.1μm）

5.动物行为分析系统：NoldusEthoVisionXT（跟踪精度0.1mm，采样率30fps）

6.皮肤渗透测试仪：LoganFDC-6（温度控制37±0.5°C，扩散面积0.64cm²）

7.细胞培养箱：ThermoScientificHeracell150i（CO2浓度5±0.2%，湿度90±5%）

8.高速离心机：Eppendorf5430R（最大转速15000rpm，温度范围-10°C至40°C）

9.实时荧光定量PCR仪：AppliedBiosystems7500（温度均匀性±0.1°C，通道数6）

10.电子天平：MettlerToledoXS205（称量精度0.01mg，量程220g）

11.全自动血液分析仪：SysmexXN-1000（检测限白细胞0.01×10⁹/L，参数18项）

12.组织切片机：LeicaRM2255（切片厚度1-100μm，精度±1μm）

13.荧光显微镜：NikonEclipseTi2（激发波长400-700nm，相机分辨率4K）

14.恒温摇床：EppendorfInnova42（转速范围20-300rpm，温度精度±0.1°C）

15.紫外可见分光光度计：ShimadzuUV-2600i（波长范围190-1100nm，带宽1nm）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"心血管药物致敏性测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。