药品过敏反应肝毒性试验

检测项目

过敏反应生物标志物检测：

• 血清免疫球蛋白E（IgE）：浓度（ng/mL，参照WHO标准）、异常升高倍数（≥2倍基线值）
• 嗜酸性粒细胞计数：绝对数（×10^9/L，参照GB/T15436）、百分比（%，±1%误差）

• 谷丙转氨酶（ALT）：活性（U/L，参照GB/T5009.199）、线性范围（0-1000U/L）
• 谷草转氨酶（AST）：活性（U/L，参照ISO15189）、AST/ALT比值（≤1.5为参考值）
• 碱性磷酸酶（ALP）：活性（U/L，参照CLSIC24-A3）、儿童与成人参考范围差异（儿童上限高30%）

• 抗核抗体（ANA）：滴度（≥1:100为阳性，参照GB/T16781.1）、核型（斑点型、均质型）
• 抗平滑肌抗体（SMA）：抗体水平（AU/mL，参照EUROIMMUN标准）、靶抗原（肌动蛋白）

• 肝细胞坏死程度：分级（0-4级，参照Scheuer评分系统）、坏死范围（局灶性/弥漫性）
• 汇管区炎症细胞浸润：细胞类型（淋巴细胞、嗜酸性粒细胞）、浸润程度（轻度/中度/重度）
• 胆汁淤积评估：胆小管扩张情况（有无）、胆红素沉积（HE染色阳性率）

• 白细胞介素-4（IL-4）：浓度（pg/mL，参照R&DSystems标准）、升高倍数（≥3倍对照组）
• 白细胞介素-5（IL-5）：浓度（pg/mL，参照ELISA试剂盒说明书）、与嗜酸性粒细胞相关性（r≥0.7）
• 白细胞介素-13（IL-13）：浓度（pg/mL，参照CLIA标准）、介导纤维化作用评估（与HA水平相关性）

• 细胞色素P4503A4（CYP3A4）：活性（pmol/min/mg蛋白，参照ICHS9）、抑制剂/诱导剂影响（活性变化±20%）
• 细胞色素P4502D6（CYP2D6）：基因型（*1/*2/*3等，参照PharmGKB数据库）、表型（代谢能力分级：强/中/弱/超快）

• 抗药物抗体（ADA）：滴度（≥1:80为阳性，参照FDA指南）、亲和力（高/中/低，采用SPR技术）
• 抗组胺受体抗体（抗H1R）：浓度（ng/mL，参照Abcam标准）、阻断活性（≥50%为阳性）

• 丙二醛（MDA）：含量（nmol/mg蛋白，参照TBARS法）、氧化损伤程度（≥2倍对照组为异常）
• 超氧化物歧化酶（SOD）：活性（U/mg蛋白，参照黄嘌呤氧化酶法）、抑制率（≥50%为正常）
• 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）：活性（U/mg蛋白，参照DTNB法）、底物消耗速率（μmol/min）

• 乳酸脱氢酶（LDH）漏出率：百分比（%，参照ISO10993-5）、与细胞死亡率相关性（r≥0.85）
• 谷氨酰转肽酶（GGT）：活性（U/L，参照GB/T18204.21）、胆汁淤积特异性（升高倍数≥3倍）

• 透明质酸（HA）：浓度（ng/mL，参照EIA法）、纤维化分期（≤100ng/mL为无纤维化）
• 层粘连蛋白（LN）：浓度（ng/mL，参照ELISA法）、与门静脉高压相关性（r≥0.7）

• 皮肤斑贴试验：反应强度（+~+++，参照ICDRG标准）、阳性率（≥10%为高风险）
• 淋巴细胞转化试验：刺激指数（SI≥2为阳性，参照ASTME1280）、增殖率（%，±5%误差）

检测范围

1.化学合成药物：涵盖小分子化学药（如抗感染药、心血管药），重点检测代谢产物（如对乙酰氨基酚代谢物N-乙酰-p-苯醌亚胺）介导的过敏反应及肝线粒体损伤（线粒体膜电位下降率）

2.生物制品：包括单克隆抗体（如PD-1抑制剂）、重组蛋白（如胰岛素），侧重免疫复合物（药物-抗体复合物）沉积引发的肝小叶中心坏死及汇管区炎症

3.中药提取物：植物药（如雷公藤提取物）、动物药（如蟾酥提取物），重点检测致敏成分（如生物碱、皂苷）导致的肝实质细胞凋亡（TUNEL阳性率）及胆汁淤积（总胆红素升高倍数）

4.疫苗：灭活疫苗（如新冠病毒灭活疫苗）、减毒活疫苗（如乙肝疫苗），侧重接种后迟发型过敏反应（72小时后出现）相关肝炎症（ALT/AST升高≥2倍）

5.抗生素类药物：β-内酰胺类（如青霉素）、大环内酯类（如红霉素），重点检测药物变态反应引发的胆汁淤积型肝损伤（ALP升高≥3倍，总胆红素升高≥2倍）

6.抗病毒药物：核苷类（如恩替卡韦）、蛋白酶抑制剂（如洛匹那韦），侧重免疫介导的肝细胞凋亡（caspase-3活性升高）及药物性肝损伤（DILI）的RUCAM评分（≥6分为肯定）

7.抗肿瘤药物：靶向治疗药物（如索拉非尼）、化疗药物（如顺铂），重点检测药物诱导的过敏反应（血清IgE升高≥2倍）合并肝纤维化（HA升高≥100ng/mL）

8.非甾体抗炎药（NSAIDs）：COX-2抑制剂（如塞来昔布）、水杨酸类（如阿司匹林），侧重过敏反应合并肝小叶中心坏死（病理评分≥2级）及GGT升高（≥3倍基线）

9.激素类药物：糖皮质激素（如泼尼松）、性激素（如雌激素），重点检测长期用药导致的肝纤维化倾向（LN升高≥50ng/mL）及免疫抑制状态下的机会性感染肝损伤

10.保健食品：营养素补充剂（如维生素A）、功能性食品（如减肥茶），重点检测非法添加药物成分（如西布曲明）引发的肝毒性（ALT升高≥5倍）及过敏反应（嗜酸性粒细胞计数≥5×10^9/L）

检测方法

国际标准：

• ISO10993-10:2021医疗器械生物学评价第10部分：致敏反应试验（推荐豚鼠最大化试验，强调阳性对照选择）
• ICHS8:2005人用药物免疫毒性研究指导原则（要求细胞因子谱检测，推荐流式细胞术）
• ASTME1986-20豚鼠皮肤致敏试验（规定皮内注射+涂皮的激发途径，强调皮肤反应评分标准）
• ISO15189:2022医学实验室质量和能力要求（规范生化指标检测的精密度与准确性，要求ALTCV≤5%）

• GB/T16886.10-2017医疗器械生物学评价第10部分：致敏反应试验（允许小鼠辅助验证，与ISO10993-10的动物模型差异）
• GB15193.18-2020食品安全国家标准药物过敏性试验（侧重血清IgE水平检测，与ICHS8的细胞因子谱终点差异）
• YY/T0606.10-2014组织工程医疗产品第10部分：致敏反应试验（允许腹腔注射替代皮内注射，与ASTME1986的激发途径差异）
• GB/T5009.199-2003食品中黄曲霉毒素B1的测定（采用高效液相色谱法，与ISO15189的生化分析仪方法差异）

检测设备

1.流式细胞仪：BDFACSCantoII（检测通道≥10，灵敏度≤100荧光分子，支持多色荧光分析）

2.全自动生化分析仪：贝克曼AU5800（检测速度≥2000测试/小时，ALT线性范围0-1000U/L，精密度CV≤2%）

3.酶联免疫吸附测定仪：ThermoMultiskanFC（波长范围400-750nm，检测下限≤0.1ng/mL，支持双波长检测）

4.实时荧光定量PCR仪：ABI7500Fast（反应体系10-100μL，扩增效率90%-110%，检测灵敏度≤1copies/μL）

5.病理切片机：LeicaRM2235（切片厚度1-10μm，精度±0.5μm，支持连续切片）

6.透射电子显微镜：JEOLJEM-1400PLUS（分辨率≤0.2nm，放大倍数1000-1,000,000×，支持能量色散谱分析）

7.超高速离心机：BeckmanOptimaXE-90（最大转速100,000rpm，最大离心力600,000×g，温度控制范围0-4℃）

8.液相色谱-质谱联用仪：Agilent1290-6460（质量范围50-1200m/z，灵敏度≤1pg/mL，支持多反应监测模式）

9.激光共聚焦显微镜：ZeissLSM880（荧光通道≥4，分辨率≤120nm，支持3D成像）

10.动物无创监测系统：PhilipsIntelliVueMP50（体温监测范围35-42℃，心率监测范围40-240次/分钟，支持实时数据传输）

11.细胞培养箱：ThermoForma3111（CO2浓度范围0-20%，温度精度±0.1℃，湿度控制≥95%）

12.生物安全柜：ESCOA2型（下降气流速度0.38m/s，流入气流速度0.5m/s，过滤效率≥99.99%）

13.紫外分光光度计：ShimadzuUV-2600（波长范围190-900nm，吸光度范围0-4AU，波长精度±0.1nm）

14.冷冻干燥机：ChristAlpha1-4LDPlus（冷凝温度≤-55℃，真空度≤0.1mbar，支持原位冻干）

15.皮肤斑贴试验仪：IQUltra（贴敷面积10×10mm，压力均匀性±5%，支持一次性贴敷多组试剂）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"药品过敏反应肝毒性试验"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。