检测项目

1.纯度分析：采用HPLC法测定主峰面积百分比≥98%，杂质峰总和≤2.0%

2.生物活性测定：通过TF-1细胞增殖试验验证ED50值在标准品80%-125%范围内

3.内毒素检测：凝胶法测定限值≤2.15EU/mg（按USP<85>标准）

4.残留宿主蛋白：ELISA法控制CHO细胞蛋白≤100ppm

5.无菌性测试：薄膜过滤法符合EP2.6.1/USP<71>无菌要求

6.等电点测定：毛细管等电聚焦电泳（cIEF）主带pI5.8-6.1

检测范围

1.原料药：重组大肠杆菌表达的非格司亭原液

2.制剂产品：注射用冻干粉针剂（规格300μg/瓶、480μg/瓶）

3.中间体：发酵液粗提物、层析纯化液

4.辅料：甘露醇、聚山梨酯80等处方成分相容性测试

5.包装材料：西林瓶胶塞可提取物/浸出物分析

检测方法

1.生物活性测定：USP<1034>细胞增殖法/EP5.3细胞计数法

2.纯度分析：ISO17025认可的HPLC-C4柱法（流动相A：0.1%TFA水溶液；B：乙腈）

3.内毒素检测：GB/T14233.2-2005凝胶限度法

4.残留DNA定量：GB/T34796-2017荧光探针法（≤10ng/剂量）

5.微生物限度：GB/T19973.1-2015微生物计数法

检测设备

1.Agilent1260InfinityIIHPLC系统：配备DAD检测器（波长214nm），用于纯度及杂质分析

2.MolecularDevicesSpectraMaxi3x多功能酶标仪：执行TF-1细胞MTT比色法活性测定

3.WatersACQUITYUPLCH-Class系统：配置BEH300C4色谱柱（1.7μm,2.1100mm），实现快速分离

4.MalvernZetasizerNanoZS90动态光散射仪：测定蛋白质粒径分布（PDI≤0.25）

5.ShimadzuLCMS-8060三重四极杆质谱仪：用于分子量确认（18,80050Da）及降解产物鉴定

6.ThermoScientificMultiskanSkyHigh酶标仪：执行ELISA法宿主蛋白残留检测

7.BeckmanCoulterPA800Plus毛细管电泳仪：配备cIEF试剂盒完成等电点分析

8.SartoriusStedimBiotech微生物检测系统：包含MilliflexQuantum快速微生物检测模块