检测项目

1.活菌数测定：采用平板计数法测定每克疫苗中布氏杆菌活菌数（≥1.010^9CFU/g）

2.纯度分析：通过选择性培养基培养验证非布氏菌污染比例（≤0.1%）

3.残余水分测定：采用卡尔费休法控制冻干制剂含水量（≤3.0%）

4.毒力试验：通过小鼠LD50试验验证减毒株安全性（LD50≥1.010^8CFU）

5.热稳定性测试：37℃加速试验7天后活菌数下降率（≤10%）

6.无菌检查：依据薄膜过滤法确认无外源微生物污染

检测范围

1.疫苗原液：包括种子批系统培养物及主代细胞库样品

2.冻干制剂成品：含保护剂的冻干粉针剂型

3.稀释用生理盐水：用于疫苗复溶的配套溶液

4.佐剂材料：氢氧化铝胶体等免疫增强剂组分

5.包装材料：西林瓶、胶塞等直接接触物

6.生产环境样本：洁净区沉降菌及表面微生物监测

检测方法

GB/T13091-2002《动物饲料中沙门氏菌检验方法》改良法用于活菌计数

ISO11737-1:2018《医疗产品灭菌-微生物学方法》指导无菌检查

WHOTRSNo.1011《生物制品生产质量管理规范》指导毒力试验

GB/T606-2023《化学试剂水分测定通用方法》卡尔费休法实施标准

EP2.6.14《欧洲药典》细菌内毒素凝胶法测定热原物质

GB4789.2-2022《食品安全国家标准食品微生物学检验》用于环境微生物监测

检测设备

1.Bio-RadCFX96Touch实时荧光定量PCR仪：用于基因稳定性分析

2.ThermoScientificHeratherm微生物培养箱：控温精度0.5℃的恒温培养设备

3.SartoriusMA35水分分析仪：符合USP<921>标准的卡尔费休滴定装置

4.MilliporeMilli-QIQ7000超纯水系统：提供符合CLSI标准的实验用水

5.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪：分析保护剂成分稳定性

6.BDBACTECFX40全自动血培养系统：快速无菌检查设备

7.MalvernMastersizer3000激光粒度仪：佐剂粒径分布分析

8.ESCOAirstreamClassII生物安全柜：符合NSF/ANSI49标准的操作防护设备

9.MettlerToledoXSR205DU分析天平：精度达0.01mg的称量系统

10.MemmertIPP110培养箱：带CO2浓度控制的恒温振荡培养装置