检测项目

1.毒素蛋白纯度测定：采用SEC-HPLC法（粒径排阻色谱），分辨率≥1.5（USP标准），纯度要求≥98.0%

2.白介素-2活性验证：基于CTLL-2细胞增殖实验，EC50值应≤1.5ng/mL（参照EP2.7.1）

3.连接物完整性分析：MALDI-TOF质谱法测定分子量偏差≤0.1%（m/z范围15,000-20,000）

4.内毒素限度检测：动态显色法（LAL试验），限值≤5.0EU/mg（符合USP<85>要求）

5.游离毒素残留量：双抗体夹心ELISA法（灵敏度0.1ng/mL），残留量≤0.5%

检测范围

1.重组蛋白药物原液及成品制剂

2.生物类似药工艺中间体

3.细胞培养上清液样本

4.冻干粉针剂复溶溶液

5.临床前研究用原料药

检测方法

1.HPLC法：参照中国药典2020年版四部通则0512（C18色谱柱）

2.生物活性测定：符合FDA指南ICHQ6B要求（CTLL-2细胞系）

3.质谱分析：ISO/TS21387:2020生物技术产品表征指南

4.残留DNA检测：GB/T34818-2017《生物药物中残留DNA测定》

5.稳定性测试：ASTME2470-20加速稳定性试验规程

检测设备

1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪（配置DAD检测器）

2.ThermoScientificQExactivePlus高分辨质谱仪（ESI源）

3.MolecularDevicesSpectraMaxi3x多功能酶标仪（支持LuminexxMAP技术）

4.WatersACQUITYUPLCH-Class系统（配备BEH200SEC色谱柱）

5.MalvernZetasizerPro动态光散射仪（粒径分析范围0.3nm-10μm）

6.ShimadzuGCMS-TQ8050三重四极杆气质联用仪（EI/CI双离子源）

7.BeckmanCoulterVi-CELLXR细胞活力分析仪（台盼蓝排除法）

8.BiacoreT200表面等离子共振仪（实时结合动力学分析）

9.MiliporeMilli-QIQ7000超纯水系统（电阻率18.2MΩcm）

10.EppendorfBioSpectrometerbasic紫外分光光度计（波长范围190-830nm）