检测项目

1.生物活性测定：采用TF-1细胞增殖抑制法，测定IC50值范围0.05-0.5ng/mL

2.蛋白质含量检测：UV280法测定浓度精度2%，SEC-HPLC纯度≥98.5%

3.电荷异质性分析：CE-SDS法检测酸性/碱性变异体≤3.0%

4.残留宿主DNA：qPCR法定量≤10pg/mg

5.内毒素检测：动态显色法测定＜2EU/mg

检测范围

1.重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白原料药

2.注射用依那西普冻干粉针剂（25mg/支）

3.预充式注射器装注射液（50mg/mL）

4.中间体溶液（原液、半成品）

5.药用辅料（蔗糖、甘露醇等赋形剂）

检测方法

1.生物活性：USP<1034>细胞培养分析法/ChP2020通则3523

2.纯度分析：ISO17025认证的RP-HPLC法（C18柱）

3.残留蛋白A：GB/T34796-2017ELISA法

4.微生物限度：GB/T14233.2-2005薄膜过滤法

5.亚可见微粒：USP<788>光阻法/GB/T0903-2011

检测设备

1.Agilent1260InfinityII高效液相色谱系统：配备DAD检测器，用于纯度分析

2.BioTekSynergyH1酶标仪：支持动态显色法内毒素检测

3.WatersACQUITYUPLCH-Class系统：超高效液相色谱分析电荷变异体

4.BeckmanCoulterPA800Plus毛细管电泳仪：CE-SDS法测定分子量分布

5.MalvernZetasizerNanoZS90：动态光散射法监测粒径分布

6.ThermoScientificQExactive质谱仪：高分辨质谱鉴定蛋白修饰

7.SartoriusCubisII微量天平：称量精度0.001mg的精密称定

8.ParticleSizingSystemsAccuSizer780APS：亚微米颗粒计数系统

9.EppendorfMastercyclerX50PCR仪：qPCR法残留DNA定量

10.MettlerToledoSevenExcellencepH计：电极精度0.01pH单位