可送检的样品类型与对应检测项目

样品类型 典型应用场景 主要检测项目 常用方法 / 参考
生咖啡豆（绿咖啡） 生豆贸易验收、拍卖与杯测前真实性核验、地理标志产品保护 物种鉴别（阿拉比卡 / 罗布斯塔 / 利比里卡）、品种指纹、罗布斯塔掺假率定量、转基因成分筛查 实时荧光定量PCR、SSR微卫星分子标记、DNA条形码（内转录间隔区与叶绿体片段联合）
烘焙咖啡豆 烘焙企业原料核验、精品单品豆打假、品牌抽检 物种鉴别、掺假筛查（降解DNA短片段扩增策略） 150碱基以内mini条形码短靶标扩增、物种特异实时荧光PCR
咖啡研磨粉 流通环节抽检、电商与投诉样品取证 外源掺杂物（大麦、玉米、大豆、菊苣、黑麦）DNA筛查、物种来源占比分析 通用植物条形码测序比对、物种特异多重PCR
速溶咖啡与咖啡浓缩液 深加工制品原料溯源、代工原料核验 物种来源鉴别、罗布斯塔占比半定量 物种特异实时荧光PCR（短靶标）、参照GB/T 19495.3-2004核酸提取流程
咖啡种苗、叶片与鲜果 种苗繁育真实性核验、育种材料权属鉴定 品种SSR或SNP指纹图谱、杂交种真实性与纯度鉴定 毛细管电泳基因分型、高通量测序指纹比对
拼配豆与挂耳咖啡制品 拼配比例核验、单品标签合规审查 罗布斯塔占比定量、多物种成分筛查 实时荧光定量PCR标准曲线法、内参基因归一化计算

检测项目

1. 物种鉴别：阿拉比卡、罗布斯塔、利比里卡三物种判定，靶标单核苷酸多态性位点不少于20个，判定一致性不低于99%

2. 罗布斯塔掺假率定量：定量范围1%-100%，生咖啡豆方法检出限0.1%，定量限约1%，贸易合同常见判定阈值不高于5%

3. 品种指纹鉴定：核心SSR微卫星位点8-24个，指纹图谱匹配度不低于95%判定为同品种

4. 转基因成分筛查：35S启动子、NOS终止子、nptII标记基因等通用筛查靶标不少于5个，检出限0.1%（质量分数）

5. DNA条形码物种比对：内转录间隔区与叶绿体基因片段联合建库比对，物种水平相似度不低于98%，属水平不低于95%

6. 外源掺杂物筛查：大麦、玉米、大豆、菊苣、黑麦等常见掺假源5-8种，单靶标检出限0.5%-1%

检测范围

1. 阿拉比卡精品品种：铁皮卡、波旁、瑰夏、卡杜拉、卡杜艾、帕卡马拉、SL28等栽培种

2. 罗布斯塔与杂交商业种：罗布斯塔各品系、卡蒂姆系、帝莫系杂交种等

3. 利比里卡与埃克塞尔萨：小众栽培种及近缘野生咖啡种质

4. 咖啡制品：烘焙豆、研磨粉、挂耳制品、速溶粉、浓缩提取液

5. 种植与育种材料：种苗、叶片、鲜果、种子、组培苗

检测方法

1. GB/T 19495.3-2004 转基因产品检测 核酸提取纯化方法

2. GB/T 19495.4-2018 转基因产品检测 实时荧光定性聚合酶链式反应（PCR）检测方法

3. GB/T 19495.5-2018 转基因产品检测 实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测方法

4. GB/T 18007-2011 咖啡及其制品 术语

5. ISO 21571:2005 食品中转基因生物及其衍生产品检测分析方法 核酸提取

6. ISO 21570:2005 食品中转基因生物及其衍生产品检测分析方法 核酸定量检测

检测设备

1. 高通量组织研磨仪：振荡频率5-30Hz，单批处理24-192个样品，兼容液氮冷冻研磨

2. 自动核酸提取仪：磁珠法，单批1-32个样品，提取流程20-40分钟

3. 超微量分光光度计：核酸浓度检测范围2-15000纳克每微升，波长230、260、280纳米

4. 实时荧光定量PCR仪：96孔反应板，五通道荧光检测，温控精度±0.25℃

5. 梯度PCR仪：温度范围4-99℃，梯度跨度1-30℃，升降温速率不低于5℃每秒

6. 毛细管电泳片段分析仪：8道毛细管，片段分辨率1-2碱基，检测范围20-1500碱基

7. 全自动基因分析仪：24道毛细管电泳测序，单端读长600-900碱基

8. 全自动凝胶成像系统：500万像素以上制冷CCD，紫外与蓝光双光源

9. 超净工作台：垂直层流，百级洁净度，平均风速0.3-0.5米每秒

10. 恒温金属浴：控温范围零下10℃至100℃，模块温控精度±0.1℃，24孔位