可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 肝素钠原料药 | 抗凝血生化原料药生产放行、出口贸易、制剂配制 | 效价、总氮量、干燥失重、酸碱度、分子量分布、细菌内毒素 | 中国药典2020年版二部肝素钠各论；美国药典、欧洲药典各论 |
| 肝素钙原料药 | 钙盐型抗凝血原料生产与注射剂配制 | 效价、钙盐鉴别、干燥失重、分子量分布、细菌内毒素 | 中国药典2020年版二部肝素钙各论 |
| 低分子量肝素原料 | 依诺肝素钠、达肝素钠、那屈肝素钙生产与注册申报 | 抗FXa活性、抗IIa活性、活性比、重均分子量及分布 | 欧洲药典各论发色底物法与分子排阻色谱法 |
| 肝素注射液 | 临床抗凝治疗、体外循环与血液透析管路抗凝 | 效价、pH值、细菌内毒素、无菌、不溶性微粒 | 中国药典2020年版四部注射剂通则与品种项 |
| 肝素粗品与提取中间体 | 猪肠黏膜肝素提取精制工艺的过程控制与放行 | 效价收率、蛋白质与核酸残留、掺假特征筛查 | 生产内控方法结合核磁共振氢谱鉴别 |
| 体外诊断用肝素抗凝制品 | 血气分析抗凝管、生化抗凝管涂层与肝素锂原料 | 肝素含量、抗凝活性均匀性、效价复核 | 行业标准与药典生物测定法 |
检测项目
1. 效价测定：肝素钠原料药每1mg效价不得少于170单位，绵羊血浆复钙凝固法结合量反应平行线统计
2. 抗FXa与抗IIa活性：发色底物法405nm定量，低分子量肝素活性比应为0.9-1.1
3. 分子量及分子量分布：分子排阻色谱联用多角度激光光散射，低分子量肝素小于8000道尔顿组分不低于60%
4. 干燥失重：105℃干燥至恒重，减失重量不得过5.0%
5. 细菌内毒素：每1单位肝素中内毒素量小于0.010EU，鲎试剂凝胶法与动态浊度法互核
6. 有关物质筛查：核磁共振氢谱鉴别过硫酸化软骨素与多硫酸软骨素掺假特征峰
检测范围
1. 肝素钠原料药：药典级与出口级，效价规格150-200单位/mg
2. 肝素钙原料药：钙盐型抗凝血原料，用于注射剂生产
3. 低分子量肝素原料：依诺肝素钠、达肝素钠、那屈肝素钙
4. 肝素注射液：2mL:12500单位等常用规格
5. 肝素粗品与提取中间体：猪肠黏膜树脂吸附洗脱液
6. 体外诊断用肝素抗凝制品：血气分析抗凝管与生化抗凝管用肝素锂
检测方法
1. 中国药典2020年版四部通则1208 肝素生物测定法（绵羊血浆复钙凝固法）
2. 中国药典2020年版四部通则1431 生物检定统计法（量反应平行线测定）
3. 中国药典2020年版二部 肝素钠与肝素钙各论（效价、总氮量、干燥失重检查）
4. 中国药典2020年版四部 细菌内毒素检查法（鲎试剂凝胶限度与定量法）
5. 欧洲药典 Heparin Sodium 各论（抗IIa与抗FXa因子发色底物法及分子量测定）
6. 美国药典 Heparin Sodium 各论（羊血浆凝固法效价测定与核磁共振鉴别）
检测设备
1. 半自动血凝仪（普利生C2000-4）：四通道凝固法检测，温育位37℃±0.5℃，计时分辨率0.1秒
2. 全自动凝血分析仪：凝固法与发色底物法双系统，检测波长405nm，温控37℃±0.1℃
3. 分子排阻色谱-多角度激光光散射联用系统：TSKgel G3000PWxl水性凝胶柱，十八角度激光检测器
4. 紫外-可见分光光度计：波长范围190-1100nm，405nm定量对硝基苯胺释放动力学
5. 核磁共振波谱仪：600MHz超导磁体，氢谱化学位移分辨率0.001ppm
6. 元素分析仪：杜马斯燃烧法测定总氮量，检测下限0.01%
7. 离子色谱仪：电导检测器，硫酸根与有机酸分离度不低于1.5
8. 细菌内毒素测定仪：动态浊度法，检测限0.001EU/mL，37℃恒温孵育
9. 恒温水浴锅：温度范围室温至100℃，控温精度±0.1℃，复钙反应专用
10. 电子分析天平：量程220g，可读性0.01mg，标准品与供试品称量专用