HPLC分离度测试

检测项目

分离效率参数：

• 分辨率（Rs）：Rs≥1.5（参照USP<621>）
• 理论塔板数（N）：N≥2000plates/m（参照EP2.2.46）
• 选择性因子（α）：α≥1.05

峰形特性：

• 拖尾因子（T）：T≤1.5（参照ICHQ2(R1)）
• 峰不对称因子（As）：As≤1.8
• 峰宽（Wb）：Wb≤0.5min

保留行为：

• 保留时间（tR）：RSD≤1.0%（参照ChP20200512）
• 容量因子（k'）：k'≥2.0
• 死时间（t0）：t0精度±0.05min

系统适用性：

• 重复性：峰面积RSD≤2.0%（参照USP<621>）
• 重现性：保留时间偏差≤±1.0%
• 基线噪声：≤0.1mAU

灵敏度指标：

• 检测限（LOD）：≤0.1μg/mL（参照EP2.2.46）
• 定量限（LOQ）：≤0.5μg/mL
• 信噪比（S/N）：S/N≥10

线性范围：

• 线性相关系数（R²）：R²≥0.999
• 线性偏差：±5.0%（参照ICHQ2(R1)）
• 范围宽度：2-200%目标浓度

精密度测试：

• 日内精密度：RSD≤1.5%
• 日间精密度：RSD≤2.0%
• 中间精密度：RSD≤2.5%（参照ChP20200512）

耐用性评估：

• 流速变化：±10%流速下Rs≥1.2
• 温度波动：±2°C下保留时间RSD≤1.0%
• 流动相比例：±5%变化下峰对称性稳定

特异性验证：

• 共存干扰：目标峰分离度Rs≥1.5
• 空白干扰：无基质峰干扰
• 降解产物分离：所有降解峰基线分离

定量准确性：

• 回收率：98-102%（参照USP<621>）
• 偏差：±2.0%
• 标准曲线斜率：0.95-1.05

检测范围

1.药品原料药及制剂：包括小分子化学药和生物制剂，检测重点为杂质分离度、主成分定量准确性和降解产物识别。

2.生物样品：涵盖血浆、尿液等基质，检测重点为代谢产物分离效率、基质效应评估和低丰度组分定量。

3.食品添加剂及污染物：包括防腐剂、农药残留，检测重点为多组分同时分离、低浓度检出限和基质干扰消除。

4.环境污染物：涉及水体、土壤样品，检测重点为重金属络合物分离、痕量有机污染物定量和环境基质兼容性。

5.天然产物提取物：包括植物提取物和精油，检测重点为复杂组分分辨率、活性成分定量和共流出峰分离。

6.高分子聚合物：涵盖聚合物添加剂和单体，检测重点为分子量分布分离、低聚物识别和粘度兼容性。

7.农药及兽药残留：涉及农产品和动物组织，检测重点为多残留同时分析、法规限值符合性和样品净化效果。

8.化妆品成分：包括香料和防腐剂，检测重点为异构体分离、稳定性指示分析和皮肤渗透模拟。

9.化工中间体：涵盖合成反应产物，检测重点为副产物分离、反应进程监控和纯度评估。

10.临床诊断标志物：涉及激素和蛋白质，检测重点为生物标志物特异性、低浓度线性范围和样品预处理优化。

检测方法

国际标准：

• USP<621>Chromatography（分辨率要求Rs≥1.5，流动相梯度控制严格）
• EP2.2.46ChromatographicSeparationTechniques（拖尾因子T≤1.5，强调柱效测试）
• ICHQ2(R1)ValidationofAnalyticalProcedures（线性范围R²≥0.998，涵盖耐用性变量）
• ISO11885:2007WaterQuality-DeterminationofElementsbyICP-MS（痕量元素分离，与HPLC互补）

国家标准：

• GB/T16631-2021高效液相色谱法通则（分离度Rs≥1.8，流速精度要求更高）
• ChP2020GeneralChapter0512HPLC（理论塔板数N≥2500plates/m，重复性RSD≤2.0%）
• GB/T23200.113-2018食品安全国家标准植物源性食品中农药残留检测（多残留分离，基质匹配优化）
• GB/T5750.8-2023生活饮用水标准检验方法有机物指标（定量限LOQ≤0.1μg/L，环境适用性差异）

（方法差异说明：USP标准强调系统适用性测试频率，EP则更注重柱温控制；GB/T16631相比USP，流速容忍度更宽但分离度阈值较高；ChP在保留时间重现性上要求比ICH更严格。）

检测设备

1.高效液相色谱仪：Agilent1260InfinityII（流速范围0.001-10mL/min，压力限600bar）

2.二极管阵列检测器：WatersACQUITYUPLCPDAeλ（波长范围190-800nm，分辨率1.2nm）

3.荧光检测器：ShimadzuRF-20Axs（激发波长200-700nm，发射波长250-900nm）

4.蒸发光散射检测器：Alltech3300ELSD（雾化温度30-120°C，增益范围1-12）

5.质谱检测器：ThermoScientificQExactive（质量范围m/z50-6000，分辨率140,000）

6.自动进样器：PerkinElmerFlexarFX-15（进样体积0.1-100μL，精度±0.5%）

7.色谱柱恒温箱：DionexTCC-3000RS（温度范围5-110°C，稳定性±0.1°C）

8.二元梯度泵：AgilentG1312B（流量精度±1%，压力脉动<1%）

9.C18反相色谱柱：WatersXBridgeBEHC18（柱长50-250mm，粒径1.7-5μm）

10.HILIC色谱柱：PhenomenexLunaHILIC（极性分离，pH范围2-8）

11.保护柱：AgilentZORBAXRRHD（兼容性高，柱压<50bar）

12.脱气机：ERCDegasit（脱气效率>99%，流速1-5mL/min）

13.柱后衍生装置：PickeringPCX5200（反应温度30-150°C，延迟体积<100μL）

14.数据采集系统：Empower3CDS（数据处理速度100Hz，兼容多检测器）

15.真空过滤装置：MilliporeMillex（孔径0.22μm，流速10-100mL/min）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"HPLC分离度测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。