检测项目
细胞活力检测：
- MTT法：IC50值（单位μM，参照ISO10993-5）
- Calcein-AM染色：活细胞百分比（≥95%置信区间）
- 台盼蓝排除法：死细胞率（≤5%）
- AnnexinV/PI双染：早期凋亡率（%）
- Caspase-3活性：相对活性单位（RFU）
- TUNEL法：DNA片段化指数（参照ASTME2526）
- PI染色：G1/S/G2-M期比例（%）
- BrdU掺入：细胞增殖指数（PI≥1.5）
- RT-qPCR：EGFR突变表达倍数（2-ΔΔCt）
- WesternBlot：蛋白磷酸化水平（灰度值比例）
- ATP测定：相对ATP含量（RLU）
- LDH释放：细胞毒性指数（%上限）
- 光学显微镜：形态变化评分（0-4级）
- 电子显微镜：线粒体肿胀程度（参照GB/T16886.5）
- ROS测定：活性氧水平（荧光强度）
- SOD活性：酶活力单位（U/mg蛋白）
- 彗星试验：尾矩值（μm）
- γ-H2AX焦点计数：DNA双链断裂点数
- 克隆形成试验：克隆形成率（%）
- 细胞增殖曲线：倍增时间（小时）
- 细胞因子ELISA：IL-6释放浓度（pg/mL）
- ADCC效应：细胞杀伤率（%）
检测范围
1.非小细胞肺癌细胞系：涵盖A549、H1975等EGFR突变型，重点检测药物敏感性及凋亡诱导效率
2.正常肺上皮细胞：如BEAS-2B，评估选择性毒性及细胞膜损伤
3.乳腺癌细胞系：MCF-7、MDA-MB-231，侧重于基因表达变化及代谢抑制
4.结直肠癌细胞：HCT116、SW480，检测细胞周期阻滞及DNA修复机制
5.肝细胞模型：HepG2，关注代谢活化毒性及线粒体功能障碍
6.神经元细胞：SH-SY5Y，重点评估神经毒性及钙信号紊乱
7.血细胞样本：外周血单核细胞，侧重免疫毒性和细胞因子风暴风险
8.干细胞培养：间充质干细胞，检测分化抑制及长期增殖影响
9.动物原代细胞：小鼠肺组织细胞，用于体内外毒性相关性分析
10.三维类器官模型：肺癌类器官，模拟肿瘤微环境毒性及药物渗透性
检测方法
国际标准：
- ISO10993-5医疗器械生物学评价-体外细胞毒性试验
- ASTME2526-08细胞活力标准测试方法
- OECDTG487体外哺乳动物细胞微核试验
- GB/T16886.5医疗器械生物学评价-第5部分：体外细胞毒性试验
- YY/T0993细胞毒性检测方法通则
- GB/T39731药物遗传毒性检测技术规范
检测设备
1.多功能酶标仪：SynergyH1型（检测波长200-1000nm，精度±0.5%）
2.流式细胞仪：FACSCantoII型（激光配置488nm/640nm，灵敏度<100MESF）
3.倒置显微镜：IX73型（物镜4X-100X，CCD分辨率5MP）
4.实时荧光定量PCR仪：7500型（温控范围4-99°C，孔间温差±0.3°C）
5.细胞培养箱：Heracell150i型（CO2控制0-20%，温度稳定性±0.1°C）
6.高速离心机：5430R型（转速100-15000rpm，温度范围-10-40°C）
7.荧光显微镜：EclipseTi2型（激发滤光片DAPI/FITC/TRITC，放大倍数400X）
8.超低温冷冻柜：TSX型（温度-86°C，容量700L）
9.生物安全柜：AirstreamAC2-4S1型（风速0.3-0.5m/s，HEPA过滤效率99.99%）
10.微孔板洗涤机：ELx405型（洗针数量96孔，流速可调范围50-300μL）
11.电化学工作站：CHI660E型（电流范围±250mA，电位精度±1mV）
12.自动细胞计数仪：CountessIIFL型（荧光通道GFP/RFP，计数精度±2%）
13.恒温摇床：Innova42型（转速20-500rpm，温度控制室温-80°C）
14.凝胶成像系统：ChemiDocMP型（检测灵敏度0.1pgDNA，分辨率20μm）
15.超纯水系统：Milli-QAdvantageA10型（电阻率18.2MΩ·cm，流量1.5L/min）