检测项目
1. PrPSc异常蛋白(检出限≤1ng)
2. 免疫组织化学染色(海马区阳性判定)
3. 组织病理学空泡变性(评分0-3级)
4. 蛋白酶K抗性消化(50μg/mL)
5. RT-QuIC荧光阈值(≥10倍本底)
检测范围
1. 牛脑组织:延髓门部
2. 脊髓样本:颈段C1-C3
3. 淋巴组织:回肠远端
4. 屠宰场固定样本:10%福尔马林
5. 脑脊液:新鲜冷冻
检测方法
1. GB/T 25172-2010 牛海绵状脑病诊断技术
2. OIE Terrestrial Manual 2021 Chapter 3.4.5 BSE
3. SN/T 1316-2011 进出境牛海绵状脑病检疫规程
4. ISO 18314-1:2015 朊蛋白Western blot检测
5. ASTM E2520-07 PrPSc免疫组织化学方法
检测设备
1. 蛋白印迹系统(Bio-Rad ChemiDoc MP):410nm/460nm荧光通道
2. 全自动免疫组化仪(Leica BOND-MAX):温控98℃
3. 荧光显微镜(Olympus BX53):激发330-385nm
4. 酶标仪(BioTek Synergy H1):450nm光密度
5. RT-QuIC荧光读数仪(BMG FLUOstar Omega):37℃振摇
6. 冷冻切片机(Leica CM1950):-20℃切片
7. 超速离心机(Beckman Optima XE-90):100000g
8. 组织匀浆仪(IKA T18):30000rpm