蛋白质含量定量测试

检测项目

总蛋白质定量：

• 凯氏定氮法：总氮含量（≥98%回收率，参照ISO5983-2:2009）、蛋白质换算系数（6.25±0.05）
• 紫外吸收法：A280吸光度（线性范围0.1-2.0OD）、消光系数校准（误差≤5%）
• BCA法：标准曲线R²≥0.99、检测限（0.5μg/mL）

• SDS-PAGE分析：条带纯度（≥95%单一条带）、分子量偏差（±5%）
• HPLC纯度：主峰面积占比（≥98%）、杂质峰积分（≤2%）
• 电泳迁移率：Rf值一致性（CV≤3%）

• 水解氨基酸：必需氨基酸占比（如赖氨酸≥5%）、总氨基酸回收率（≥95%）
• 游离氨基酸：浓度范围（0.01-100μM）、标准偏差（≤5%）

• Lowry法：Folin试剂反应（线性范围5-100μg/mL）、干扰物校正（如糖类≤10%）
• Bradford法：染料结合量（A595吸光度）、校准曲线斜率（0.8-1.2）

• 凝胶过滤色谱：分子量分布（SD≤500Da）、保留时间重复性（RSD≤2%）
• 质谱分析：精确质量（误差≤10ppm）、多电荷态解析

• 热稳定性：变性温度（Tm值±1°C）、聚集起始点（浊度≤5NTU）
• pH稳定性：等电点测定（pI±0.2）、溶解度变化（≥90%溶解度）

• 体外消化：蛋白水解度（DH≥80%）、肽段释放率
• 酶解效率：蛋白酶活性（单位/mg）、产物分子量分布

• 乳化活性：乳化指数（EI≥50%）、稳定性（≥90%保持率）
• 凝胶强度：破裂力（≥100g）、弹性模量（G'≥50Pa）

• 还原SDS-PAGE：亚基数（精确计数）、二硫键还原率（≥95%）
• 非还原电泳：寡聚体比例（单体≥85%）

• 内毒素：LAL法检测（≤0.25EU/mL）、标准曲线合规
• 重金属残留：铅含量（≤0.1ppm）、砷限量（≤0.05ppm）

检测范围

1.乳制品：包括牛奶、奶酪和酸奶，重点检测酪蛋白和乳清蛋白含量、热变性程度及营养标签合规性

2.肉类产品：涵盖禽肉、红肉和加工肉制品，侧重肌肉蛋白总量、胶原蛋白比例及掺假物筛查

3.谷物和豆类：如大豆、小麦和玉米粉，检测粗蛋白含量、氨基酸平衡及抗营养因子影响

4.生物医药制剂：包括抗体药物、疫苗和重组蛋白，聚焦纯度、活性浓度及稳定性指标

5.饲料原料：涵盖鱼粉、豆粕和添加剂，重点测定消化率、必需氨基酸谱及污染物限量

6.保健品和营养品：如蛋白粉和氨基酸补充剂，检测标签宣称值验证、生物利用度及杂质残留

7.植物提取物：包括藻类、叶蛋白和发酵产品，侧重提取效率、功能活性及分子量分布

8.环境样品：如废水、土壤渗出液，检测蛋白质污染物浓度、生物降解率及生态风险评估

9.细胞培养液：涵盖哺乳动物和微生物发酵液，重点监控蛋白表达量、代谢副产物及收获时机

10.化妆品原料：如胶原蛋白和肽类，检测活性成分浓度、热稳定性及皮肤渗透性

检测方法

国际标准：

• ISO5983-2:2009动物饲料蛋白质测定-凯氏定氮法
• AOAC990.03食品中总蛋白质测定-改良Lowry法
• ISO21572:2019食品分子生物学方法-蛋白质定量PCR
• ICHQ6B生物技术产品测试-蛋白质纯度色谱法

• GB5009.5-2016食品安全国家标准食品中蛋白质的测定
• GB/T6432-2018饲料中粗蛋白测定方法
• GB/T35809-2018生物制品蛋白质含量测定-紫外分光光度法
• GB/T37864-2019体外诊断试剂蛋白质稳定性试验

检测设备

1.紫外可见分光光度计：PerkinElmerLambda35（波长范围190-1100nm，带宽1nm）

2.凯氏定氮系统：BÜCHIK-435（蒸馏效率99.5%，氮回收率≥98%）

3.BCA蛋白检测试剂盒：ThermoScientificPierce（检测限0.5μg/mL，线性范围5-2000μg/mL）

4.HPLC系统：Agilent1260Infinity（C18柱分离，流速0.1-5mL/min，检测器DAD）

5.SDS-PAGE电泳仪：Bio-RadMini-PROTEANTetra（凝胶浓度4-20%，电压范围50-200V）

6.微量分析天平：SartoriusCPA2.7F（量程0.001mg-220g，精度±0.002mg）

7.离心机：Eppendorf5430R（最大转速15000rpm，温度控制-10-40°C）

8.恒温摇床：NewBrunswickInnova44（振荡范围25-300rpm，温度精度±0.1°C）

9.ELISA酶标仪：BioTekSynergyH1（检测模式双波长，动态范围0-4OD）

10.质谱仪：ThermoFisherQExactive（分辨率140,000，质量精度≤1ppm）

11.pH计：MettlerToledoSevenExcellence（范围0-14，精度±0.001）

12.恒温水浴：MemmertWNB14（温度范围5-100°C，均匀度±0.1°C）

13.凝胶成像系统：SyngeneGBox（分辨率20MP，UV/白光光源）

14.旋涡混合器：IKAVortexGenius3（转速300-3000rpm，定时功能）

15.冷冻干燥机：ChristAlpha1-4LSCplus（冷凝温度-80°C，真空度≤0.01mbar）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"蛋白质含量定量测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。