检测项目
菌落总数检测:
- 菌落总数:CFU/g、CFU/mL(参照GB 4789.2-2016)
- 大肠菌群:MPN/100g、MPN/100mL(参照GB 4789.3-2016)
- 沙门氏菌:定性检测(参照ISO 6579-1:2017)
- 金黄色葡萄球菌:定量检测(CFU/g,参照GB 4789.10-2016)
- 李斯特菌:定性检测(参照GB 4789.30-2016)
- 黄曲霉毒素B1:μg/kg(参照GB 5009.22-2016)
- 赭曲霉毒素A:ng/g(参照ISO 15141-1:2000)
- 呕吐毒素:μg/kg(参照GB 5009.111-2016)
- 组胺:mg/kg(参照GB 5009.208-2016)
- 酪胺:mg/kg(参照ISO 19340:2017)
- 表面微生物:CFU/100cm²(参照GB/T 16292-2010)
- 浮游菌:CFU/m³(参照GB/T 16293-2010)
- 乳酸菌计数:CFU/g(参照GB 4789.35-2016)
- 双歧杆菌计数:CFU/g(参照GB 4789.34-2016)
- 细菌总数:CFU/g、CFU/mL(参照中国药典四部通则1105-2020)
- 霉菌和酵母菌总数:CFU/g、CFU/mL(参照中国药典四部通则1105-2020)
- 粪大肠菌群:定性检测(参照GB 7918.2-1987)
- 铜绿假单胞菌:定性检测(参照GB 7918.4-1987)
- 总大肠菌群:MPN/100mL(参照GB 3838-2002)
- 耐热大肠菌群:MPN/100mL(参照GB/T 5750.12-2016)
- 沉降菌:CFU/皿(参照GB/T 16294-2010)
- 空气洁净度:级(参照ISO 14644-1:2015)
检测范围
1. 食品原料: 包括谷物、肉类、乳制品、果蔬等初级农产品,重点检测致病菌(沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌)及真菌毒素(黄曲霉毒素B1、呕吐毒素)
2. 预包装食品: 涵盖糕点、饮料、方便食品、罐头等加工食品,侧重菌落总数、大肠菌群及防腐剂(如山梨酸钾)有效性评估
3. 药品制剂: 包括片剂、注射液、软膏、胶囊等药品,重点检测微生物限度(细菌总数、霉菌酵母菌)及无菌检查(参照中国药典四部通则1101)
4. 化妆品: 涵盖护肤品、化妆品、卫生用品(如卫生巾),侧重粪大肠菌群、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等致病菌
5. 环境样品: 包括车间空气、生产设备表面、饮用水、土壤等,重点检测浮游菌、表面微生物(CFU/100cm²)及总大肠菌群
6. 农产品: 包括新鲜蔬菜、水果、禽蛋、蜂蜜等,侧重致病菌(沙门氏菌、李斯特菌)及农药残留(如有机磷)协同微生物污染
7. 饲料: 包括畜禽饲料、水产饲料、宠物饲料等,重点检测黄曲霉毒素B1、呕吐毒素及沙门氏菌
8. 包装材料: 包括食品包装纸、塑料瓶、铝箔袋等,侧重迁移微生物(菌落总数、大肠菌群)及溶出物(如塑化剂)对微生物生长的影响
9. 医疗用品: 包括注射器、手术敷料、输液管等,重点检测无菌性及病原微生物(如乙肝病毒、丙肝病毒)
10. 水体样品: 包括河水、湖水、地下水、海水等,侧重总大肠菌群、耐热大肠菌群及藻类毒素(如微囊藻毒素)
检测方法
国际标准:
- ISO 6579-1:2017 沙门氏菌检测(预增菌采用缓冲蛋白胨水,增菌采用四硫磺酸钠煌绿肉汤,选择性培养采用XLD琼脂)
- ISO 4833-1:2013 菌落总数测定(平板计数法,培养温度30℃±1℃,培养时间72h±3h,与GB 4789.2的差异在于培养温度和时间)
- ISO 15141-1:2000 赭曲霉毒素A测定(免疫亲和柱净化,高效液相色谱法,荧光检测器,激发波长333nm,发射波长477nm)
- GB 4789.2-2016 食品微生物学检验 菌落总数测定(平板计数法,培养温度36℃±1℃,培养时间48h±2h,与ISO 4833-1的差异在于培养温度高、时间短)
- GB 4789.3-2016 食品微生物学检验 大肠菌群计数(MPN法,采用乳糖胆盐发酵管,与ISO 4832的差异在于培养基含胆盐,抑制革兰阳性菌)
- GB 5009.22-2016 食品中黄曲霉毒素B1的测定(高效液相色谱法,荧光检测器,提取溶剂为甲醇-水(70:30),与AOAC 991.31的差异在于提取溶剂比例)
- GB/T 16292-2010 医药工业洁净室(区)悬浮粒子的测试方法(激光粒子计数器法,采样点数量按面积计算,与ISO 14644-1的差异在于采样点分布密度)
检测设备
1. 微生物培养箱: BINDER KB 240型(温度范围10℃-60℃,精度±0.1℃,湿度控制40%-90%RH,用于菌落总数、致病菌培养)
2. 高压蒸汽灭菌器: SANYO MLS-3750型(容积75L,工作压力0.142MPa,温度121℃,灭菌时间15-30min,用于培养基、玻璃器皿灭菌)
3. 生物安全柜: Thermo Fisher 1300 Series A2型(气流速度0.5m/s,过滤效率99.99%,内部体积1.2m³,用于致病菌检测的无菌操作)
4. 荧光显微镜: Olympus BX53型(放大倍数40×-1000×,荧光激发波长365nm/488nm,分辨率0.2μm,用于真菌孢子、荧光标记微生物观察)
5. 高效液相色谱仪: Agilent 1260 Infinity型(配备荧光检测器,流速范围0.1-10mL/min,柱温箱温度范围5℃-80℃,用于黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A测定)
6. 菌落计数器: COLONY COUNTER 500型(自动计数精度±1%,计数范围0-999 CFU,背光照明,用于菌落总数统计)
7. 激光粒子计数器: TSI 9306型(粒径范围0.3μm-10μm,采样流量28.3L/min,计数效率50%@0.3μm,用于洁净室悬浮粒子测试)
8. 实时荧光定量PCR仪: ABI StepOne Plus型(检测通道4个,反应体积10-100μL,灵敏度10 copies/μL,用于致病菌(如沙门氏菌)快速检测)
9. 厌氧培养箱: COY Laboratories 8500型(厌氧条件≤10ppm O2,温度范围25℃-40℃,湿度控制60%-80%RH,用于厌氧菌(如双歧杆菌)培养)
10. 超纯水机: Millipore Milli-Q Integral型(电阻率18.2MΩ·cm@25℃,总有机碳≤5ppb,微生物含量≤1CFU/mL,用于培养基配制、仪器分析)
11. 酶标仪: Bio-Rad Model 680型(波长范围400-750nm,吸光度范围0-4.0A,分辨率0.001A,用于酶联免疫吸附试验(ELISA)检测真菌毒素)
12. 离心机: Eppendorf 5810R型(最大转速14000rpm,最大离心力18600×g,容量4×50mL,用于样品提取液离心分离)
13. 恒温摇床: INFORS HT Multitron型(振荡频率0-300rpm,振幅25mm,温度范围15℃-60℃,用于微生物增菌培养)
14. 自动微生物鉴定系统: VITEK 2 Compact型(鉴定时间4-18h,鉴定范围包括细菌、酵母菌,数据库含2000+种微生物,用于未知微生物鉴定)
15. 原子吸收光谱仪: PerkinElmer AAnalyst 200型(检测限≤0.01mg/L,波长范围190-900nm,分辨率0.002nm,用于金属离子(如铅)对微生物生长影响分析)