检测项目
自由基清除能力测试:
- DPPH清除率:IC50值(参照AOAC2012.03)
- ABTS清除率:清除率百分比(参照ISO14502-1)
- 羟基自由基清除率:清除率百分比
- FRAP法:铁还原能力值(μmolFe²⁺/g)
- CUPRAC法:铜还原能力值(μmolTrolox/g)
- ORAC法:氧自由基吸收能力(μmolTE/g)
- 总酚含量:Folin-Ciocalteu法(mgGAE/g,参照GB/T5009.124-2016)
- 总黄酮含量:铝比色法(mgRE/g)
- 单宁含量:分光光度法(mgTAE/g)
- 超氧化物歧化酶(SOD)活性:抑制率百分比
- 过氧化氢酶(CAT)活性:酶活单位(U/mg)
- 谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性:酶活单位(U/mg)
- 丙二醛(MDA)含量:硫代巴比妥酸法(nmol/mg)
- 还原型谷胱甘肽(GSH)水平:DTNB比色法(μmol/g)
- 氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值:荧光法
- TBARS测定:丙二醛当量(nmol/mg)
- 脂质氢过氧化物含量:比色法(μmol/g)
- 铁离子螯合率:百分比(参照AOAC2011.25)
- 铜离子螯合率:百分比
- 清除率:百分比
- 半抑制浓度:IC50值
- 抗坏血酸含量:HPLC法(mg/g)
- 总抗坏血酸当量:比色法(mgAAE/g)
- 多糖含量:苯酚-硫酸法(mg/g)
- 多糖清除自由基能力:DPPH法(清除率百分比)
检测范围
1.灵芝水提取物:采用热水浸提工艺,检测重点为亲水性抗氧化成分如多糖和酚类物质。
2.灵芝乙醇提取物:乙醇溶剂提取,侧重脂溶性抗氧化成分如三萜类和黄酮。
3.灵芝多糖提取物:纯化多糖组分,重点检测多糖的抗氧化活性和结构稳定性。
4.灵芝三萜类提取物:富集三萜化合物,检测其自由基清除能力和细胞保护作用。
5.灵芝孢子粉:完整孢子样品,评估整体抗氧化能力及生物可利用性。
6.灵芝子实体提取物:子实体部位提取,检测不同组织部位的抗氧化差异。
7.不同产地灵芝样品:涵盖东北、西南等产区,比较地理因素对氧化活性的影响。
8.超临界CO₂提取物:采用超临界流体技术,重点检测无溶剂残留的抗氧化效能。
9.灵芝胶囊产品:成品制剂,检测活性成分稳定性和体外抗氧化一致性。
10.灵芝茶饮料:液态产品,侧重水溶性抗氧化成分的溶解度和时效性。
检测方法
国际标准:
- AOAC2012.03DPPH自由基清除试验方法
- ISO14502-1食品和饮料中总酚含量测定方法
- ISO17070:2006抗氧化能力ORAC测定方法
- GB/T5009.124-2016食品中总酚的测定方法
- GB/T22244-2008保健食品中总黄酮测定方法
- 中国药典2020版灵芝项下抗氧化活性检测方法
检测设备
1.紫外-可见分光光度计:UV-1800型(波长范围190-1100nm,精度±0.5nm)
2.荧光分光光度计:F-7000型(激发波长200-900nm,发射波长220-900nm)
3.高效液相色谱仪:1260Infinity型(检测器:DAD,流速范围0.001-10mL/min)
4.高速离心机:Centrifuge5430型(转速范围0-15000rpm,容量至4×100mL)
5.恒温水浴锅:HH-6型(温度范围室温至100℃,精度±0.1℃)
6.电子分析天平:AUW220D型(称量范围0.0001g-220g,精度±0.0001g)
7.振荡培养箱:TS-100型(频率50-300rpm,温度范围4-60℃)
8.pH计:PHS-3C型(测量范围0-14,精度±0.01)
9.超纯水系统:Milli-Q型(产水电阻率≥18.2MΩ·cm,流量1-2L/min)
10.恒温培养箱:LRH-250型(温度范围0-60℃,湿度控制30-95%)
11.真空干燥箱:DZF-6050型(真空度0.098MPa,温度范围室温至250℃)
12.旋转蒸发仪:RE-52AA型(蒸发瓶容量50-5000mL,真空度≤5mbar)
13.冷冻干燥机:FD-1A-50型(冷阱温度-50℃,真空度≤10Pa)
14.超声波提取器:KQ-500DE型(频率40kHz,功率500W)
15.酶标仪:MultiskanGO型(波长范围340-850nm,检测模式:吸光/荧光)