可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 肝、肾组织匀浆 | 氧化应激损伤研究、药物肝肾毒性评价、营养干预实验 | 超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、过氧化物酶POD、谷胱甘肽过氧化物酶活力、丙二醛配套定量 | WST-1显色法(450 nm);紫外速率法(240 nm);GB/T 41906-2022 |
| 肌肉组织 | 运动代谢研究、肉品品质与宰后糖酵解评价、肌病模型检测 | 乳酸脱氢酶LDH、琥珀酸脱氢酶、肌原纤维ATP酶、糖原磷酸化酶活力 | 340 nm速率法(NADH偶联);考马斯亮蓝法蛋白定量归一化 |
| 脑及神经组织 | 神经生化机制研究、神经递质代谢评价、学习记忆模型检测 | 乙酰胆碱酯酶AChE、Na+/K+-ATP酶、单胺氧化酶MAO、一氧化氮合酶活力 | Ellman比色法(412 nm,DTNB显色);定磷法测定ATP酶 |
| 黏膜、腺体与分泌组织 | 口腔及消化道屏障研究、唾液腺与泪腺功能评价 | 溶菌酶、酸性磷酸酶ACP、碱性磷酸酶ALP、髓过氧化物酶MPO活力 | 比浊法(溶壁微球菌底物);GB/T 30990-2014 |
| 胃肠及消化腺组织 | 饲料消化率评估、消化功能与酶学机理研究 | α-淀粉酶、脂肪酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶活力 | 碘-淀粉比色法;福林酚法;GB/T 23527.1-2023 |
| 肿瘤及移植瘤组织 | 肿瘤侵袭转移机制研究、抗肿瘤药效酶学评价 | 基质金属蛋白酶MMP-2/-9明胶酶活力、乳酸脱氢酶同工酶谱、端粒酶相关组分活力 | 明胶酶谱电泳;340 nm速率法同工酶分析 |
| 医用材料接触界面组织 | 植入与介入材料周围组织反应的生物化学表征 | 碱性磷酸酶ALP、酸性磷酸酶ACP、髓过氧化物酶MPO活力 | 对硝基苯磷酸二钠底物比色法(405 nm);取样与生物安全参照GB/T 43051-2023 |
检测项目
1. 超氧化物歧化酶SOD活性:WST-1法450 nm测定,抑制率控制在10%~60%线性区间,结果以U/mg蛋白计,组织匀浆常见值为每毫克蛋白1~50 U量级
2. 过氧化氢酶CAT活性:紫外速率法240 nm监测过氧化氢分解速率,每分钟分解1 μmol底物记为1 U,肝组织样本常见每克组织数十至数百U
3. 过氧化物酶POD活性:愈创木酚显色470 nm连续监测3 min,以每分钟吸光度变化0.01定义1 U,结果以U/g组织或U/mg蛋白计
4. 溶菌酶活性:以溶壁微球菌悬液为底物的比浊法,监测450 nm吸光度下降速率,检出下限可达每毫升或每克组织1 U水平
5. 蛋白酶活力:福林酚法以酪蛋白为底物,37℃孵育后经碱性铜与福林酚显色,680 nm比色定量,结果以U/g组织计
6. 乳酸脱氢酶LDH活性:340 nm速率法监测NADH氧化速率,在酶促反应线性期取前60 s数据计算,结果以U/L匀浆液或U/g蛋白计
检测范围
1. 新鲜及冻存动物组织:肝、肾、心、脑、肌肉、脾等实质脏器与骨骼肌样本
2. 黏膜与腺体样本:口腔黏膜、肠黏膜、唾液腺、泪腺及乳腺组织
3. 实验动物模型组织:肝纤维化、脑缺血、肌萎缩等模型组的处理与对照组组织
4. 肿瘤及移植瘤组织:皮下成瘤、原位成瘤模型剥离的瘤块组织
5. 材料植入界面组织:骨科植入物、可降解支架周围取出的界面组织样本
检测方法
1. GB/T 41906-2022 超氧化物歧化酶活性检测方法
2. GB/T 30990-2014 溶菌酶活性检测方法
3. GB/T 32131-2015 辣根过氧化物酶活性检测方法 比色法
4. GB/T 23527.1-2023 酶制剂质量要求 第1部分:蛋白酶制剂
5. GB/T 5009.171-2003 保健食品中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定
6. GB/T 43051-2023 实验动物 动物实验生物安全通用要求(取样操作与生物安全参照)
检测设备
1. 紫外可见分光光度计(UV-2600型):波长范围190~1100 nm,光谱带宽1 nm,波长准确度±0.3 nm
2. 全波长酶标仪(Synergy H1型):检测波长200~999 nm,支持吸光度、荧光、化学发光三种模式,配套37℃恒温孵育
3. 高速冷冻离心机(H1850R型):最高转速18500 r/min,控温范围-20℃~40℃
4. 低温组织研磨仪(SCIENTZ-48型):48孔适配,工作频率可达70 Hz,配套液氮预冷操作
5. 高速剪切匀浆机(T18系列):转速1000~18000 r/min连续可调,处理量0.5~50 mL
6. 恒温水浴槽(DK-8D型):控温范围室温至100℃,波动±0.5℃
7. 电子分析天平(BSA224S型):量程0~220 g,可读性0.1 mg
8. 超低温保存箱:控温范围-40℃~-86℃,容积600 L量级,用于组织样本长期留存
9. 涡旋混合器(VORTEX-Genie 2型):最高转速3200 r/min,点动与连续双模式
10. 单道可调移液器(Research plus系列):量程0.1~1000 μL多规格覆盖,配合低吸附吸头使用