可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 石蜡包埋组织切片（FFPE） | 科研样本库组织制片、靶标表达观察、回顾性样本分析 | 切片形态学评价、免疫荧光染色、荧光原位杂交信号检测、核酸提取前质量评估 | GB/T 42216.4-2024《分子体外诊断检验 福尔马林固定及石蜡包埋组织检验前过程的规范 第4部分：原位检测技术》；GB/T 42216.1-2022 |
| 冰冻切片（OCT包埋） | 新鲜组织快速制片、脂质保留与酶活性原位观察 | 切片完整性、荧光染色定位、自发荧光水平评估 | 冰冻制片通用协议；GB/T 14926.52-2001《实验动物 免疫荧光试验》 |
| 细胞爬片与细胞涂片 | 培养细胞亚细胞结构定位、蛋白表达与转运观察 | 核质定位、细胞骨架排列、共定位分析、阳性细胞率 | 免疫荧光通用协议；DAPI核复染联合FITC、TRITC通道成像 |
| 植物组织切片 | 植物发育研究、病原侵染部位原位观察 | 叶绿素自发荧光、病原定点杂交信号、组织结构观察 | GB/T 28630.3-2012《白斑综合征(WSD)诊断规程 第3部分：原位杂交检测法》方法思路 |
| 组织芯片（TMA）切片 | 大批量样本标志物筛查与验证 | 点阵完整性、批量染色一致性、荧光信号定量 | 组织芯片通用协议；逐点扫描定量成像 |
| 硬组织不脱钙切片 | 骨植入材料界面观察、骨形成动态评价 | 荧光双标记（四环素、钙黄绿素）沉积带间距、矿化前沿观察 | 不脱钙树脂包埋硬组织切片通用协议 |
检测项目
1. 切片质量评价：石蜡切片厚度3~5μm、冰冻切片厚度6~10μm，检查褶皱、刀痕与脱片情况，脱片率控制在5%以内
2. 荧光染色定位检测：DAPI核复染联合目的靶标通道，观察定位准确性与分布模式，信噪比不低于3
3. 共定位分析：双通道或多通道图像计算Pearson相关系数，范围0~1，共定位判定典型阈值不低于0.6
4. 荧光原位杂交信号检测：计数阳性信号点数量与分布模式，对照样本信号检出率不低于95%的细胞
5. 自发荧光与背景评估：阴性对照通道背景强度测定，阳性组与阴性组荧光强度比值不低于5倍判为有效信号
检测范围
1. FFPE组织切片：福尔马林固定石蜡包埋的动物与人体科研样本，常规厚度3~5μm
2. 冰冻切片：OCT包埋新鲜组织，厚度6~10μm，保留脂质与酶活性
3. 细胞样品：培养细胞爬片、离心涂片，多聚甲醛或甲醇固定
4. 植物切片：根、茎、叶幼嫩组织石蜡切片或半薄切片
5. 组织芯片：多组织点阵石蜡切片，单点直径0.6~2.0mm
检测方法
1. GB/T 42216.4-2024 分子体外诊断检验 福尔马林固定及石蜡包埋组织检验前过程的规范 第4部分：原位检测技术
2. GB/T 42216.1-2022 分子体外诊断检验 福尔马林固定及石蜡包埋组织检验前过程的规范 第1部分：分离RNA
3. GB/T 14926.52-2001 实验动物 免疫荧光试验
4. GB/T 28630.3-2012 白斑综合征(WSD)诊断规程 第3部分：原位杂交检测法
5. GB/T 40251-2021 牡蛎单孢子虫病诊断规程 原位杂交法
6. GB/T 47065-2026 表面化学分析 表面表征 共聚焦荧光显微镜横向分辨的测量
检测设备
1. 正置荧光显微镜(BX53)：四组激发滤块覆盖紫外、蓝光、绿光、红光通道，物镜10×~100×
2. 激光共聚焦显微镜(LSM 900)：405/488/561/633nm四激光器，Z轴步进最小0.1μm，支持光学层切
3. 荧光倒置显微镜(IX83)：适配细胞爬片与活细胞观察，四色滤块转换
4. 冰冻切片机(CM1950)：箱体控温-35~10℃，切片厚度范围0.5~60μm
5. 轮转式石蜡切片机(RM2235)：切片厚度0.5~60μm，切片精度连续可调
6. 全自动组织脱水机(Excelsior ES)：多站梯度脱水透明，程序化运行
7. 石蜡包埋机(EG1150H)：蜡温60~70℃可控，配套冷台快速定型
8. 摊片烤片机(HI1220)：数控加热，常规摊片45~50℃、烤片60~65℃
9. 科研级显微镜相机(DS-Ri2)：制冷型感光芯片，低照度荧光成像，曝光时间毫秒至秒级可调
10. 全自动染色机：HE与免疫荧光染色程序化运行，缸位十段以上，节拍可编