可送检的样品类型与对应检测项目
| 样品类型 | 典型应用场景 | 主要检测项目 | 常用方法 / 参考 |
|---|---|---|---|
| 甘蔗脱毒组培苗（瓶苗、生根苗） | 科研育种单位原原种扩繁、脱毒苗出厂放行 | 品种纯度、新出叶片数、株高、根茎粗、白色根条数、目标病原带毒检出率 | 《糖料蔗脱毒种苗质量要求（试行）》（桂糖〔2023〕31号）组培苗口径；NY/T 3179-2018检测流程 |
| 假植袋装苗、杯（篮）苗 | 组培苗驯化移栽后的商品苗出圃与田间移栽 | 苗高、假茎粗、叶片数、根系条数、整齐度、带毒率 | NY/T 3179-2018袋装苗形态口径；NY/T 1804-2009花叶病毒DAS-ELISA与RT-PCR |
| 商品脱毒种茎（单芽段、双芽段） | 种茎加工厂切段、消毒、包衣处理后供种 | 种茎茎径、芽段长度、含水量、盆栽发芽率、凤梨病率、螟害节率 | 桂糖〔2023〕31号加工供种口径；NY/T 1785-2009种茎生产技术规程 |
| 良繁基地一、二、三级种茎 | 糖料蔗良种逐级繁育体系供种验收 | 品种纯度、成熟芽数、盆栽发芽率、螟害节率、虫株害率、黑穗病与梢腐病病株率 | 桂糖〔2023〕31号分级表；DB45/T 2032-2019逐级繁育技术规程；NY/T 1796-2009 |
| 调运、引种种苗批次 | 跨省调运及国外引种隔离试种放行 | 品种真实性、品种纯度、检疫性有害生物筛查、带毒率 | GB 15569-2009调运检疫规程；NY/T 1786-2009品种鉴定规范 |
| 疑似带病种苗 | 黑穗病、花叶病、宿根矮化疑似株甄别 | 症状检出率、病原特异性检测（PCR、ELISA） | GB/T 35874-2018黑穗病抗性鉴定参照；GB/T 36829-2018宿根矮化病菌荧光PCR |
检测项目
1. 品种纯度：脱毒组培苗要求100%，一级、二级、三级种茎分别不低于99%、97%、95%，种茎加工厂供种不低于95%（桂糖〔2023〕31号口径）
2. 盆栽发芽率：20～30℃盆栽条件下，一级种茎不低于95%，二级、三级种茎不低于90%，加工供种种茎不低于85%
3. 病虫害指标：螟害节率一、二、三级分别不超过3.0%、4.0%、5.0%，黑穗病与梢腐病病株率执行同档限值，凤梨病率不超过4.0%，棉蚜虫和粉蚧虫株害率不超过3.0%～5.0%
4. 种茎形态与理化指标：种茎茎径不低于1.8cm，芽段长度不低于10cm，含水量60%～75%，每茎成熟芽数不超过17个
5. 脱毒组培苗质量：品种纯度100%，株高不低于7.0cm，新出叶片不少于4片，根茎粗不低于0.2cm，1.0cm以上白色根不少于2条，目标病原带毒检出率为0
检测范围
1. 脱毒组培苗：瓶苗、继代壮苗、生根瓶苗等组培阶段苗体
2. 假植驯化苗：袋装苗、杯（篮）苗、苗床假植苗
3. 商品种茎：单芽段、双芽段、梢头种茎及消毒包衣处理种茎
4. 繁育体系种苗：原原种、原种、生产用种各级脱毒种苗
5. 主栽品种苗：新台糖22号（ROC22）、桂糖42号、粤糖93-159、云蔗05-51等
检测方法
1. NY/T 1796-2009 甘蔗种苗（质量指标、检验方法与检验规则）
2. NY/T 3179-2018 甘蔗脱毒种苗检测技术规范（形态指标与带毒检测流程）
3. NY/T 1804-2009 甘蔗花叶病毒检测技术规范（DAS-ELISA与RT-PCR法）
4. GB/T 36829-2018 甘蔗宿根矮化病菌实时荧光PCR检测方法
5. NY/T 1786-2009 农作物品种鉴定规范 甘蔗（品种真实性与纯度评价）
6. GB/T 35874-2018 甘蔗黑穗病抗性鉴定技术规程（病株率调查参照）
7. GB 15569-2009 农业植物调运检疫规程（调运批次检疫要求）
检测设备
1. 实时荧光定量PCR仪（Bio-Rad CFX96）：5通道荧光检测，温控精度±0.2℃，宿根矮化病菌等病原特异性检测
2. 酶标仪（BioTek ELx808）：波长范围400～750nm，配405nm、450nm、630nm滤光片，DAS-ELISA读数
3. 自动核酸提取仪（Promega Maxwell RSC）：磁珠法，单批48样本，苗体总核酸提取
4. 稳压稳流电泳系统（Bio-Rad PowerPac系列）：电压50～300V，PCR产物与SSR指纹凝胶电泳
5. 电子天平（梅特勒托利多ME204）：量程220g，可读性0.1mg，单芽称重与含水量测定
6. 电热鼓风干燥箱（上海一恒DHG-9070A）：室温+10～250℃，105℃恒重法测种茎含水量
7. 智能光照培养箱（宁波东南GXZ-380B）：控温0～50℃，光照0～30000lx，20～30℃盆栽发芽试验
8. 电动数显游标卡尺（三丰500-196）：量程0～150mm，分辨率0.01mm，种茎茎径与芽段长度测量
9. 体视显微镜（奥林巴斯SZ61）：8×～50×连续变倍，芽体形态与病虫害症状检查
10. 数显糖度计（爱拓PAL-1）：量程0～53°Bx，分辨率0.1°Bx，种茎汁液锤度参考测定