能量代谢影响因素研究测试

检测项目

基础代谢参数：

• 静息代谢率：能量消耗值（kcal/day，参照ISO11782:2018）
• 呼吸商：RQ比值范围（0.7-1.0，标准生理波动）
• 热效应：进食后代谢增幅（≥10%）

线粒体功能评估：

• 氧化磷酸化效率：ATP生成率（μmol/min/mg，要求≥80%）
• 膜电位稳定性：荧光强度变化率（ΔΨm≤15%）
• 电子传递链活性：复合物I-IV速率（nmoles/min/mg）

酶活性测定：

• ATP合成酶：活性值（μmol/min/mg，GB/T31002-2022）
• 柠檬酸合酶：比活性（>200U/mg）
• 己糖激酶：Km值测定（≤0.1mM）

底物利用率：

• 葡萄糖氧化率：CO2生成量（mL/g/h）
• 脂肪酸β-氧化：乙酰辅酶A积累（nmol/min）
• 氨基酸代谢：氮平衡指数（-5至+5g/day）

激素水平检测：

• 胰岛素敏感性：HOMA-IR值（标准范围1.0-2.5）
• 甲状腺激素：游离T3浓度（3.1-6.8pmol/L）
• 皮质醇：应激响应阈值（≥200ng/mL）

环境因素响应：

• 温度适应代谢：热中性区偏移（±2°C）
• 缺氧耐受：乳酸积累率（≤10%）
• 光照周期影响：昼夜节律振幅（≥20%）

细胞代谢表型：

• 糖酵解通量：ECAR值（mpH/min）
• 氧化应激指标：ROS生成量（荧光单位，≤1000）
• 自噬活性：LC3-II/LC3-I比值（1.5-3.0）

组织特异性代谢：

• 肌肉糖原储备：浓度（mg/g组织，≥50）
• 肝脏脂质代谢：甘油三酯含量（≤5%）
• 脑组织氧耗：CMRO2值（μmol/g/min）

病理模型评估：

• 糖尿病代谢紊乱：胰岛素抵抗指数（≥2.0）
• 肥胖能量失衡：脂肪氧化率（≤60%）
• 癌症代谢重编程：瓦伯格效应强度（乳酸/葡萄糖比率≥1.5）

营养干预响应：

• 宏量营养素平衡：蛋白/碳水比（0.8-1.2）
• 微量营养素缺乏：维生素B12影响（活性下降≥20%）
• 膳食纤维效应：SCFA产生速率（μmol/h）

检测范围

1.啮齿动物模型：涵盖C57BL/6小鼠及SD大鼠，重点检测饮食诱导肥胖下的基础代谢率变化及肝脏脂质积累

2.人类全血样本：静脉采集EDTA抗凝血，侧重分析胰岛素敏感性及红细胞氧运输效率

3.细胞培养体系：HEK293及C2C12细胞系，聚焦线粒体功能测试及糖酵解通量响应药物干预

4.肌肉组织活检：骨骼肌和心肌样本，检测糖原储备及氧化磷酸化效率在运动负荷下的适应性

5.脂肪组织样本：皮下和内脏脂肪，重点评估脂解速率及炎症因子关联的能量消耗

6.脑组织切片：海马和皮层区域，突出神经代谢的氧耗率及谷氨酸转运活性

7.肝脏组织：新鲜或冷冻样本，侧重糖异生路径效率及药物性肝损伤的代谢偏移

8.肠道微生物群：粪便样本提取物，检测短链脂肪酸生成及宿主能量吸收关联

9.离体线粒体制剂：从组织分离的线粒体，聚焦复合物活性及膜电位稳定性测试

10.病理状态样本：糖尿病或癌症患者来源，重点量化代谢重编程标志物如乳酸脱氢酶活性

检测方法

国际标准：

• ISO11782:2018动物能量代谢测量方法（间接测热法，采样间隔15min）
• OECDTG451致癌性研究中的代谢测试（整合慢性暴露评估）
• ASTMF2312-11细胞代谢分析标准（使用微孔板读数器，电极校准频率更高）
• ISO10993-5:2009医疗器械的体外细胞毒性（包含代谢抑制率评估）
• CLSIEP07-A3临床酶活性测定指南（强调线性范围验证）

国家标准：

• GB/T31002-2022生物样品中酶活性测定（采用分光光度法，比ISO标准增加温度梯度测试）
• GB/T5009.86-2023维生素测定方法（覆盖B族维生素对代谢影响，样本处理更简化）
• GB/T35844-2018人体能量消耗监测（使用活动记录仪，数据采样率与国际标准差异为±5%）
• GB/T34796-2023线粒体呼吸功能检测（基于Clark电极，校准周期缩短50%）
• GB/T27818-2011化学品代谢动力学测试（整合体外模型，暴露时间设置不同）

检测设备

1.间接测热系统：ColumbusCLAMS系列（代谢笼容量：500g动物，精度±1.5%，O2/CO2传感器分辨率0.01%）

2.细胞代谢分析仪：SeahorseXF96（通量：96孔板，实时OCR/ECAR测量，温度控制±0.1°C）

3.酶标仪：BioTekSynergyH1（波长范围：200-1000nm，检测限0.001OD，孔间CV≤2%）

4.分光光度计：ShimadzuUV-2600（光谱带宽：0.1nm，波长精度±0.3nm，适用于动力学酶活性）

5.气相色谱仪：Agilent8890（FID检测器，分离效率≥10000plates，用于脂肪酸代谢产物）

6.液相色谱质谱联用仪：WatersXevoTQ-S（质量范围：5-2000m/z，灵敏度1pg/mL，激素定量）

7.线粒体分离系统：BeckmanOptimaXPN（离心力：100000×g，纯度≥95%，温度控制4°C）

8.组织匀浆器：IKAT10（转速：30000rpm，刀头材质钛合金，匀浆粒度≤5μm）

9.实时PCR仪：RocheLightCycler480（热循环速率：4.8°C/s，荧光通道：6色，代谢基因表达）

10.冷冻切片机：LeicaCM1950（切片厚度：1-100μm，温度范围-35°C至+60°C，组织代谢定位）

11.氧电极系统：HansatechOxygraph+（氧耗测量范围：0-500nmol/min，分辨率0.1nmol）

12.生物发光检测仪：BertholdCentroLB960（发光灵敏度：0.1fmolATP，用于ATP生成率）

13.微透析系统：CMA402（流速：0.1-5μL/min，回收率≥80%，活体代谢监测）

14.恒温振荡培养箱：MemmertIN260（温度范围：-10°C至+100°C，湿度控制±1%，细胞代谢培养）

15.荧光显微镜：OlympusIX83（CCD分辨率：5MP，活细胞成像用于ROS检测）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"能量代谢影响因素研究测试"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检检测技术研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。