核酸样品质量控制检测

检测项目

1.浓度测定：使用紫外分光光度法或荧光法，浓度范围1-1000ng/μL，允许偏差±5%

2.纯度评估：A260/A280比值1.8-2.0为纯DNA，1.9-2.1为纯RNA，偏差±0.1

3.完整性检测：通过琼脂糖凝胶电泳，DNA条带清晰无降解，RNA完整性数（RIN）≥7.0

4.蛋白质污染物检测：A260/A230比值≥2.0，蛋白质浓度≤0.1μg/μL

5.盐分污染物检测：电导率测定值≤10μS/cm，盐浓度≤5mM

6.片段大小分析：DNA片段大小分布100bp-10kbp，偏差±5%

7.荧光定量准确性：使用荧光染料如PicoGreen，检测下限0.1ng/μL，线性范围0.1-1000ng/μL

8.pH值测定：pH范围7.0-8.5，允许偏差±0.2

9.酶抑制物检测：通过qPCR扩增效率评估，效率值90%-110%

10.微生物污染检测：细菌或真菌污染阴性，通过培养或PCR方法确认

11.氧化损伤评估：8-oxo-dG含量测定，阈值≤0.1%总碱基

12.降解程度量化：通过电泳条带强度比，降解指数≤0.2

检测范围

1.血液DNA样品：从全血或血清提取，浓度10-500ng/μL，侧重纯度A260/A280≥1.8

2.组织RNA样品：来自动物或植物组织，RIN值≥7.0，避免降解

3.细胞培养物DNA：培养细胞提取，浓度5-200ng/μL，检测蛋白质污染≤0.05μg/μL

4.质粒DNA：超螺旋结构占比≥90%，浓度50-1000ng/μL，片段大小确认

5.病毒RNA样品：从病毒颗粒提取，浓度1-100ng/μL，完整性通过RT-PCR验证

6.环境DNA样品：土壤或水样提取，浓度0.1-50ng/μL，污染物盐分≤10mM

7.法医样本DNA：低浓度样品0.1-10ng/μL，强调降解指数≤0.3和污染物检测

8.植物基因组DNA：从叶片或种子提取，浓度20-300ng/μL，多糖污染物A260/A230≥1.8

9.细菌基因组DNA：细菌培养提取，浓度10-200ng/μL，检测酶抑制物通过qPCR

10.线粒体DNA：特异性提取，浓度5-100ng/μL，纯度A260/A280≥1.9

11.FFPE组织DNA：福尔马林固定石蜡包埋样品，降解程度较高，评估片段大小≥100bp

12.合成核酸样品：寡核苷酸或引物，浓度100-5000ng/μL，检测盐分和纯度

检测方法

国际标准：

ISO22174:2005分子生物学方法核酸提取和纯化

ISO20395:2018Biotechnology—Requirementsforevaluatingtheperformanceofquantificationmethodsfornucleicacidtargetsequences

ASTME2882-19JianCeGuideforAnalysisofNucleicAcidsbySpectrophotometry

ISO21571:2005Foodstuffs—Methodsofanalysisforthedetectionofgeneticallymodifiedorganismsandderivedproducts—Nucleicacidextraction

ASTME3021-15JianCeGuideforRiskAssessmentinDNATesting

ISO20166:2018Molecularinvitrodiagnosticexaminations—Specificationsforpre-examinationprocessesforformalin-fixedandparaffin-embedded(FFPE)tissue

ASTME3130-18JianCePracticeforDeterminingtheIntegrityofNucleicAcids

ISO17822:2020Invitrodiagnostictestsystems—Nucleicacidamplification-basedexaminationproceduresfordetectionandidentificationofmicrobialpathogens

ASTME3230-19JianCeGuideforNucleicAcidExtraction

ISO20688:2018Biotechnology—Nucleicacidsynthesis—Part1:Generalrequirements

国家标准：

GB/T19495.1-2004转基因产品检测核酸提取部分

GB/T30989-2014核酸定量测定紫外分光光度法

GB/T37872-2019分子生物学检测DNA纯度及完整性评估

GB/T34796-2017核酸浓度测定荧光染料法

GB/T38165-2019人体血液DNA样品质量控制规范

GB/T39769-2021核酸样品中污染物检测方法

GB/T40982-2021核酸检测用引物和探针质量要求

GB/T41366-2022动物组织RNA完整性检测方法

GB/T41871-2022微生物核酸提取纯化技术规范

GB/T42742-2023法医DNA检验样品质量控制

检测设备

1.紫外分光光度计：型号UV-Spec200.波长范围190-800nm，测量精度±0.001Abs，用于A260/A280比值测定

2.荧光分光光度计：型号Fluoro-Quant300.检测范围0.1-1000ng/μL，激发/发射波长适配常见染料如PicoGreen

3.凝胶成像系统：型号GelImage500.分辨率5MP，支持紫外和可见光成像，用于电泳条带分析

4.实时荧光PCR仪：型号qPCR-800.96孔板设计，温度控制精度±0.1°C，用于定量和抑制物检测

5.电泳仪：型号Electro-100.电压范围0-300V，电流0-400mA，支持琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶

6.超微量分光光度计：型号Nano-View200.样品体积0.5-2μL，检测下限0.1ng/μL，用于低浓度样品

7.生物分析仪：型号BioAnalyzer2100.基于微流体技术，自动评估RNA完整性数（RIN）和片段大小

8.离心机：型号Centri-3000.最大转速15000rpm，温度控制4-40°C，用于样品制备和纯化

9.核酸提取仪：型号Extract-400.自动化处理96samples/run，支持多种样本类型，提取效率≥95%

10.酶标仪：型号PlateReader-96.光吸收和荧光检测模式，高通量筛查污染物和浓度

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"核酸样品质量控制检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检检测技术研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。