检测项目
1.菌种鉴定:通过16SrRNA基因序列分析和API50CHL生化试剂盒验证特异性
2.活菌数测定:采用平板计数法(CFU/g)与流式细胞术双重验证
3.代谢产物分析:定量检测乳酸(HPLC法)、乙酸(GC-MS法)及短链脂肪酸含量
4.抗生素敏感性:依据CLSIM45-A3标准测试12类抗生素耐药性
5.基因表达稳定性:通过qRT-PCR测定应激相关基因(groEL、dnaK)表达水平
检测范围
1.益生菌制剂:胶囊剂、粉剂及液态发酵产物
2.发酵乳制品:酸奶、奶酪及乳清蛋白基质产品
3.食品添加剂:微胶囊化冻干菌粉及复合益生元配方
4.动物饲料:畜禽预混料及水产养殖用微生态制剂
5.临床样本:肠道菌群移植制剂及体外诊断试剂盒
检测方法
1.ISO15214:1998《食品微生物学-乳酸菌计数》
2.GB4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》
3.ASTME2148-23《流式细胞术测定微生物活性标准指南》
4.ISO10932:2010《乳制品中益生菌的鉴定指南》
5.GB/T34224-2017《饲料添加剂乳酸菌类微生物制剂》
检测设备
1.ThermoFisherQuantStudio5实时荧光定量PCR仪(基因鉴定)
2.BDPhoenixM50全自动微生物鉴定系统(表型分析)
3.Agilent1260InfinityII高效液相色谱仪(代谢产物分离)
4.BeckmanCoulterCytoFLEX流式细胞仪(活菌计数)
5.ShimadzuGC-2030气相色谱质谱联用仪(挥发性酸分析)
6.BioTekSynergyH1多功能酶标仪(OD600值测定)
7.MemmertINCOmed培养箱(37℃1℃厌氧培养)
8.SartoriusCubisII电子天平(0.1mg精度称量)
9.EppendorfCentrifuge5920R高速冷冻离心机(菌体分离)
10.MiliporeMilli-QIQ7000超纯水系统(试剂配制)