检测项目

1.核酸内切酶活性浓度测定：线性范围0.01-100U/μL，灵敏度≤0.005U/μL

2.温度耐受性测试：20-80℃梯度温控0.5℃精度

3.pH稳定性分析：pH5.0-9.0缓冲体系下酶活保留率测定

4.非特异性切割率评估：超螺旋DNA底物降解度≤3%

5.金属离子依赖性验证：Mg+/Mn+/Ca+浓度梯度0-10mM

6.热灭活效率验证：65℃处理20min后残留活性≤0.1%

检测范围

1.重组蛋白药物：单克隆抗体、细胞因子等生物制剂终产品

2.病毒载体疫苗：腺病毒载体、慢病毒载体纯化液

3.质粒DNA制品：基因治疗用超螺旋DNA原料药

4.细胞治疗产品：CAR-T细胞培养上清及冻存液

5.基因编辑工具：CRISPR-Cas9复合体纯化产物

6.酶制剂中间体：限制性内切酶粗提物及精制溶液

检测方法

ISO11737-1:2018生物负载测定-核酸酶活性定量法

ASTME2148-01(2021)重组DNA制品内源性核酸酶检测规程

GB/T34796-2017核酸纯化试剂盒中残留核酸酶检验方法

GB4789.30-2016食品安全国家标准核酸酶活性测定

EP2.6.14(欧洲药典)药用物质中核酸酶活性限度检查法

USP<1132>(美国药典)基因治疗产品残留核酸酶分析通则

检测设备

ThermoScientificNanoDropOne：紫外分光光度计，波长范围190-850nm，分辨率1nm

Agilent2100Bioanalyzer：微流控芯片电泳系统，DNA灵敏度0.1ng/μL

AppliedBiosystemsQuantStudio5：实时荧光定量PCR仪，温控精度0.1℃

BeckmanCoulterProteomeLabPF2D：二维液相色谱系统，压力范围0-600bar

MalvernZetasizerNanoZS：动态光散射仪，粒径检测范围0.3nm-10μm

PerkinElmerLabChipGXII：毛细管电泳系统，片段分析精度2bp

SartoriusCubisIIMSA：微量天平，称量范围0.1μg-52g

EppendorfMastercyclerX50s：梯度PCR仪，升降温速率6℃/s

TecanInfiniteM200Pro：多功能酶标仪，动态范围0-4OD@230nm

Bio-RadChemiDocMP：化学发光成像系统，像素分辨率4.2MP