检测项目

1.骨髓铁染色（普鲁士蓝染色）：定量分析环形铁粒幼细胞比例（≥15%为阳性阈值），观察铁颗粒分布形态

2.血清铁代谢六项：包括血清铁（正常值11-30μmol/L）、总铁结合力（45-75μmol/L）、转铁蛋白饱和度（20-50%）、血清铁蛋白（男性30-400μg/L；女性13-150μg/L）

3.血红素合成酶活性测定：δ-氨基酮戊酸合成酶（ALAS2）活性（参考值0.8-1.5U/mgHb）

4.线粒体功能检测：ATP生成速率（正常＞2.5nmol/min/10^6细胞）、线粒体膜电位（JC-1染色法）

5.基因突变筛查：ALAS2基因外显子测序（覆盖c.517T>C等热点突变）、SF3B1基因（检出限0.1%VAF）

检测范围

1.外周血样本：EDTA抗凝全血用于血常规及网织红细胞计数

2.骨髓穿刺液：肝素钠抗凝骨髓液用于细胞形态学及流式分析

3.血清/血浆样本：分离胶采血管获取血清用于铁代谢指标检测

4.石蜡包埋组织：骨髓活检标本进行免疫组化（CD71、GlyA标记）

5.DNA样本：磁珠法提取基因组DNA（浓度≥20ng/μL）用于二代测序

检测方法

1.ISO15189:2012《医学实验室质量和能力要求》指导骨髓涂片制备

2.GB/T22576-2021《医学实验室试剂用质控品》规范血清铁蛋白检测

3.ICSH2018指南推荐流式细胞术分析CD71+/CD235a+红细胞系前体细胞

4.ASTME3066-16标准规定电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）测定铜蓝蛋白

5.WS/T405-2012《血细胞分析参考区间》建立网织红细胞绝对值标准

检测设备

1.SysmexXN-9000全自动血液分析仪：实现网织红细胞分群（RET-He参数）

2.LeicaDM6B正置荧光显微镜：配备QWin图像分析系统进行铁粒幼细胞计数

3.RocheCobas8000生化分析仪：化学发光法测定铁代谢指标（CV＜3%）

4.IlluminaNovaSeq6000测序平台：150bp双端读长进行全外显子组测序

5.BDFACSCantoII流式细胞仪：八色荧光分析红细胞系分化抗原

6.Agilent7900ICP-MS：测定锌原卟啉/游离红细胞原卟啉比值（ZnPP/FEP）

7.ThermoScientificVarioskanLUX酶标仪：比色法测定ALAS2酶活性

8.OlympusBX53显微镜配套CellSens软件：自动计算环形铁粒幼细胞占比

9.BeckmanCoulterDxFLEX流式细胞仪：CD71/CD235a双标分析红系成熟度

10.QiagenQIAcube全自动核酸提取仪：磁珠法提取DNA用于基因检测