植物病毒检测

检测项目

血清学检测：

• ELISA检测：灵敏度≥1ng/mL、特异性≥95%（参照ISO 16140）
• Western Blot：检测限0.1μg、条带清晰度（参照GB/T 27404）
• 免疫层析试纸：反应时间≤5min、准确率≥98%

分子检测：

• RT-PCR：扩增效率90-110%、检测限10 copies/μL（参照ISO 22174）
• qPCR：Ct值≤35、熔解曲线单一峰（参照GB/T 34776）
• LAMP检测：灵敏度1fg/μL、时间≤60min

电子显微镜检测：

• 负染色观察：分辨率≤2nm、病毒形态识别
• 超薄切片：厚度≤70nm、组织定位（参照ISO 16740）

生物测定：

• 指示植物接种：发病率≥90%、症状分级
• 病毒纯化：纯度≥95%、得率≥80%

核酸杂交：

• Southern Blot：特异性结合率≥98%、背景噪点≤5%
• 斑点杂交：检测限1pg、信号强度量化

下一代测序：

• RNA-Seq：覆盖度≥90x、组装准确率≥99%
• 宏基因组分析：病毒检出率≥95%、数据库匹配

病毒分离培养：

• 细胞培养：感染率≥80%、CPE观察
• 昆虫媒介接种：传毒效率≥70%

症状学评估：

• 田间调查：病斑面积≤5%、分级标准
• 潜伏期检测：时间≤14天、症状一致性

抗性测试：

• 抗病毒药剂筛选：抑制率≥50%、EC50值
• 寄主抗性评价：发病率≤10%、分级指数

快速诊断：

• 侧流层析：检测时间≤10min、便携性
• 荧光定量：动态范围1-10^6 copies、重复性CV≤5%

检测范围

1. 粮食作物： 涵盖水稻、小麦、玉米等，重点检测种子带毒率、田间传播动态及产量损失评估。

2. 果树类： 如苹果、柑橘、葡萄，检测重点在嫁接传播风险、果实品质下降及潜伏感染监控。

3. 蔬菜作物： 包括番茄、黄瓜、辣椒，侧重病毒交叉感染、叶片畸形及防控措施验证。

4. 观赏植物： 如玫瑰、兰花、菊花，检测重点在花卉市场检疫、症状隐蔽性及病毒扩散控制。

5. 药用植物： 涵盖人参、甘草、薄荷，侧重活性成分影响、种苗健康认证及GAP规范。

6. 林木资源： 如松树、杨树、桉树，检测重点在森林生态系统病毒传播、树干溃疡及抗性育种。

7. 草皮与牧草： 包括草坪草、苜蓿等，侧重地面覆盖病毒监测、根系感染及耐寒性测试。

8. 种子与种苗： 如杂交种子、组培苗，检测重点在进出口检疫、病毒携带率≤0.1%及发芽率保障。

9. 组培繁殖材料： 涵盖脱毒苗、克隆植株，侧重无菌环境病毒残留、生长一致性及认证标准。

10. 进出口植物产品： 如新鲜果蔬、干制品，检测重点在跨境病毒风险、冷链运输影响及ISPM合规。

检测方法

国际标准：

• ISO 16140 微生物检测方法验证要求
• ISO 22174 食品中病毒检测PCR技术规范
• ISPM 31 国际贸易植物检疫措施
• ISO 16740 电子显微镜病毒形态学标准
• ISO 20236 水质病毒检测通则

国家标准：

• GB/T 27404 实验室质量控制规范植物病毒部分
• GB/T 34776 植物病毒实时荧光PCR检测方法
• SN/T 2122 进出境植物病毒检疫规程
• GB/T 36851 植物病毒血清学检测技术
• NY/T 396 农作物病毒病诊断技术

（方法差异说明：国际标准如ISO 16140强调多实验室验证，而国家标准GB/T 27404更注重日常质控流程；PCR方法中ISO 22174要求严格引物设计，GB/T 34776则优化本土病毒引物库；电子显微镜ISO 16740定义分辨率阈值，GB标准整合田间样本处理。）

检测设备

1. PCR仪： 型号96孔定量PCR系统（温度范围4-99°C，精度±0.1°C）

2. ELISA读板机： 型号多功能酶标仪（波长范围400-750nm，吸光度精度±0.01）

3. 电子显微镜： 型号透射电镜TEM（分辨率≤0.2nm，加速电压80-120kV）

4. 离心机： 型号高速冷冻离心机（最大转速20000rpm，温度控制-20至40°C）

5. 电泳系统： 型号凝胶电泳仪（电压范围50-300V，胶槽尺寸20x20cm）

6. 核酸提取仪： 型号自动提取工作站（通量96样本/次，提取效率≥95%）

7. 杂交炉： 型号旋转杂交仪（温度范围30-80°C，转速5-20rpm）

8. 测序平台： 型号高通量测序仪（读长≥150bp，通量100Gb/run）

9. 培养箱： 型号恒温振荡培养箱（温度范围15-50°C，湿度控制±2%）

10. 超净工作台： 型号层流洁净台（洁净度Class 100，风速0.3-0.6m/s）

11. 分光光度计： 型号紫外可见分光仪（波长范围190-1100nm，精度±1nm）

12. 冻干机： 型号真空冷冻干燥系统（冷阱温度-80°C，干燥速率≥1kg/h）

13. 自动采样器： 型号液体处理机器人（移液精度±0.5μL，通量384孔）

14. 光学显微镜： 型号倒置显微镜（放大倍数40-1000x，数码成像）

15. 数据记录仪： 型号多通道记录器（温度记录范围-50至150°C，精度±0.5°C）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

以上是与"植物病毒检测"相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。