检测项目

酶活性检测：

• 乳酸脱氢酶（LDH）同工酶：总活性（U/L，参照ISO 15194）、LDH1/LDH2比率（≥0.8正常值）
• 肌酸激酶（CK）同工酶：CK-MB百分比（%，如≥2.5%心肌损伤）、总CK活性（U/L）
• 碱性磷酸酶（ALP）同工酶：骨源型活性（U/L，≥150U/L异常）

• 琼脂糖凝胶电泳：迁移距离（mm）、条带分辨率（≥0.5mm）
• 聚丙烯酰胺凝胶电泳：分子量测定（kDa）、同工酶亚型数量（≥3条带）
• 等电聚焦电泳：等电点（pI值，精度±0.1）

• 酶联免疫吸附试验（ELISA）：特异性结合率（%，≥95%有效）、交叉反应性（≤5%）
• 放射免疫分析：灵敏度（ng/mL，检测限0.01ng/mL）
• 免疫印迹：条带强度（灰度值，参照标准图谱）

• 高效液相色谱（HPLC）：保留时间（min）、峰面积百分比（%）
• 离子交换色谱：洗脱体积（mL）、纯度（≥98%）
• 亲和色谱：结合常数（Kd，μM）

• 米氏常数（Km）：值范围（mM，如0.1-10mM）
• 最大反应速率（Vmax）：单位时间活性变化（U/min）
• 抑制剂效应：抑制率（%，如≥50%有效）

• 温度稳定性：半衰期（h，≥24h稳定）
• pH稳定性：最佳pH范围（如7.0-7.5）
• 储存稳定性：活性损失率（≤5%/月）

• SDS-PAGE：亚基分子量（kDa）
• 凝胶过滤色谱：表观分子量（kDa）
• 质谱分析：精确质量（Da，误差±0.01%）

• 底物特异性：相对活性（%，≥90%专一）
• 抑制剂特异性：IC50值（μM）
• 抗体交叉反应：假阳性率（≤1%）

• 标准曲线线性：相关系数（R²≥0.99）
• 检测限：最低浓度（μg/mL，如0.001μg/mL）
• 精密度：相对标准偏差（RSD≤2%）

• 催化效率：kcat/Km（s⁻¹M⁻¹）
• 热变性温度：Tm值（°C）
• 辅因子依赖性：活性恢复率（%，≥80%）

检测范围

1. 血清样本： 用于临床疾病诊断，重点检测LDH同工酶谱异常（如LDH1升高示心肌梗死）及CK-MB百分比

2. 血浆样本： 分析凝血相关同工酶，侧重抗凝剂干扰评估及ALP同工酶分布

3. 尿液样本： 监测肾脏疾病标志物，检测重点为γ-谷氨酰转移酶（GGT）同工酶活性及稳定性

4. 组织匀浆： 研究肿瘤或炎症标记物，侧重CK同工酶比例分析及电泳条带鉴定

5. 细胞裂解液： 用于细胞生物学研究，重点检测AST/ALT同工酶活性变化及动力学参数

6. 食品提取物： 确保食品安全，检测重点为淀粉酶同工酶纯度及残留活性

7. 环境样本： 评估污染生物标志物，侧重微生物源同工酶特异性及定量限

8. 药品制剂： 质量控制酶类药物，重点分析同工酶稳定性及免疫交叉反应

9. 生物制品： 疫苗或诊断试剂生产，检测重点为同工酶分子量一致性及功能验证

10. 研究试剂： 实验室标准品验证，侧重同工酶标准曲线线性及精密度

检测方法

国际标准：

• ISO 15194:2009 酶活性测定方法（血清样本）
• ASTM E2520-15 电泳分析标准（迁移率测定）
• CLSI EP05-A3 免疫检测精密度验证
• ISO 17025:2017 实验室通用要求（方法验证）

• GB/T 5009.XX-2020 食品酶检测（同工酶活性）
• GB/T 16886.XX-2021 医疗器械生物评价（同工酶稳定性）
• GB/T 27417-2017 检测方法确认（定量限）
• GB/T 601-2016 化学试剂标准（分子量测定）

检测设备

1. 紫外可见分光光度计： Shimadzu UV-2600型（波长范围190-1100nm，精度±0.2nm）

2. 电泳系统： Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra型（电压范围50-500V，分辨率0.1mm）

3. 酶标仪： Thermo Multiskan SkyHigh型（检测波长200-1000nm，孔间差≤1%）

4. 高效液相色谱仪： Agilent 1260 Infinity II型（流速范围0.001-10mL/min，检测限0.01μg/mL）

5. 离心机： Eppendorf 5430R型（转速100-15000rpm，温度控制±1°C）

6. 质谱仪： Waters Xevo G2-XS型（质量范围50-80000Da，精度±0.001Da）

7. 等电聚焦设备： GE Healthcare IPGphor型（pH梯度3-10，分辨率0.01pH）

8. 凝胶成像系统： Syngene GBox型（像素500万，灰度动态范围0-4.0OD）

9. 实时PCR仪： Applied Biosystems 7500型（温度精度±0.1°C，荧光通道4个）

10. 恒温培养箱： Memmert IN110型（温度范围5-70°C，稳定性±0.5°C）

11. 微孔板洗板机： BioTek ELx405型（洗涤体积50-300μL，残留率≤0.5%）

12. 冷冻干燥机： Labconco FreeZone型（冷阱温度-80°C，真空度0.001mbar）

13. 振荡培养箱： New Brunswick Innova42型（转速50-300rpm，温度均一性±0.2°C）

14. pH计： Mettler Toledo SevenExcellence型（测量范围0-14，精度±0.01）

15. 超低温冰箱： Thermo Scientific Forma 900型（温度-86°C，波动±1°C）

北检(北京)检测技术研究院【简称：北检院】

报告：可出具第三方检测报告(电子版/纸质版)。

检测周期：7~15工作日，可加急。

资质：旗下实验室可出具CMA/CNAS资质报告。

标准测试：严格按国标/行标/企标/国际标准检测。

非标测试：支持定制化试验方案。

售后：报告终身可查，工程师1v1服务。

　　以上是与同工酶检测相关的简单介绍，具体试验/检测周期、检测方法和仪器选择会根据具体的检测要求和标准而有所不同。北检研究院将根据客户需求合理的制定试验方案。