检测项目
性状与鉴别:
- 性状检查:形状、大小、表面色泽、纹理、种脐位置(参照《中国药典》通则0212)
- 显微鉴别:种皮栅状细胞长度(≥80μm)、内胚乳细胞形态(参照《中国药典》通则2001)
- 薄层色谱(TLC)鉴别:与斯皮诺素、酸枣仁皂苷A对照品斑点一致性(参照《中国药典》通则0502)
- 斯皮诺素含量:高效液相色谱法(HPLC),不得少于0.080%(参照《中国药典》通则0512)
- 酸枣仁皂苷A含量:高效液相色谱法(HPLC),不得少于0.030%(参照《中国药典》通则0512)
- 水分测定:烘干法,不得过9.0%(参照《中国药典》通则0832第二法)
- 总灰分测定:不得过5.0%(参照《中国药典》通则2302)
- 酸不溶性灰分测定:不得过1.5%(参照《中国药典》通则2302)
- 铅(Pb)限量:≤5.0 mg/kg(参照《中国药典》通则2321 ICP-MS法)
- 镉(Cd)限量:≤1.0 mg/kg(参照《中国药典》通则2321 ICP-MS法)
- 砷(As)限量:≤2.0 mg/kg(参照《中国药典》通则2321 ICP-MS法)
- 汞(Hg)限量:≤0.2 mg/kg(参照《中国药典》通则2321 ICP-MS法)
- 铜(Cu)限量:≤20.0 mg/kg(参照《中国药典》通则2321 ICP-MS法)
- 33种禁用农药筛查:气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)/液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS),不得检出(参照《中国药典》通则2341)
- 常用农药多残留检测:有机氯、拟除虫菊酯等(参照《中国药典》通则2341)
- 黄曲霉毒素B1限量:≤5.0 μg/kg(参照《中国药典》通则2351 LC-MS/MS法)
- 黄曲霉毒素总量(B1,B2,G1,G2)限量:≤10.0 μg/kg(参照《中国药典》通则2351 LC-MS/MS法)
- 二氧化硫(SO2)残留量:蒸馏-碘滴定法,≤150 mg/kg(参照《中国药典》通则2331)
- 微生物限度检查:需氧菌总数(≤10⁵ CFU/g)、霉菌和酵母菌总数(≤5×10³ CFU/g)、耐胆盐革兰阴性菌(≤10⁴ CFU/g)(参照《中国药典》通则1105/1106)
- 控制菌检查:沙门菌(不得检出)、大肠埃希菌(不得检出)(参照《中国药典》通则1106)
- JianCe2序列测序:与标准序列相似度≥98%(参照《中国药典》通则9107)
- 水溶性浸出物:热浸法,不得少于18.0%(参照《中国药典》通则2201)
- 醇溶性浸出物:热浸法(乙醇),不得少于12.0%(参照《中国药典》通则2201)
检测范围
1. 酸枣仁原药材: 检测重点为基原鉴别(性状、显微、DNA条形码)、水分、灰分、杂质及外源性污染物(重金属、农残、二氧化硫)。
2. 炒酸枣仁炮制品: 检测重点为炒制程度(色泽、气味)、活性成分含量(斯皮诺素、酸枣仁皂苷A)变化、焦糊物检查及浸出物测定。
3. 酸枣仁配方颗粒: 检测重点为特征图谱一致性、含量测定(指标成分转移率)、水分、溶化性、粒度分布及微生物限度。
4. 酸枣仁提取物: 检测重点为斯皮诺素/酸枣仁皂苷A含量(≥20%)、溶剂残留、重金属、农残、微生物及干燥失重。
5. 含酸枣仁的中成药制剂: 检测重点为酸枣仁TLC鉴别、指标成分含量测定(需考虑处方干扰)、微生物限度和制剂通则项检查。
6. 酸枣仁饮片(生品): 检测重点为净度(杂质≤2%)、水分、灰分、药屑杂质及性状是否符合《中国药典》切片要求。
7. 进口酸枣仁: 检测重点为基原确认(DNA条形码)、符合中国标准(特别是农残、重金属限量)及检疫性有害生物筛查。
8. 酸枣仁粉末: 检测重点为显微特征、细度(过五号筛≥95%)、掺杂检查(显微、TLC)、水分及微生物。
9. 酸枣仁油: 检测重点为脂肪酸组成(GC分析)、酸价(≤3.0 mg KOH/g)、过氧化值(≤0.15 g/100g)、溶剂残留及黄曲霉毒素B1。
10. 酸枣仁功能性食品原料: 检测重点为标志性成分含量、安全性指标(重金属、农残、微生物)、非法添加物筛查及符合GB 16740要求。
检测方法
国际标准:
- USP <561> Articles of Botanical Origin:植物源性药材通则(性状、显微、外来有机物)
- EP 2.8.2 Herbal drugs:草药专论(干燥失重、总灰分、TLC鉴别)
- ISO 21527-1:2008 Yeasts and moulds count:酵母菌和霉菌计数(适用于微生物限度)
- AOAC Official Method 999.10 Lead, Cadmium, Copper, Iron, and Zinc in Foods:食品中重金属测定(ICP-MS参考)
- 《中国药典》2020年版一部 酸枣仁项下:法定检测方法(性状、鉴别、含量测定、检查项)
- GB 5009.3-2016 食品安全国家标准 食品中水分的测定:第一法(直接干燥法)
- GB 5009.4-2016 食品安全国家标准 食品中灰分的测定:总灰分及酸不溶性灰分
- GB 5009.11-2014 食品安全国家标准 食品中总砷及无机砷的测定:电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)
- GB 5009.12-2017 食品安全国家标准 食品中铅的测定:石墨炉原子吸收光谱法/ICP-MS法
- GB 5009.15-2014 食品安全国家标准 食品中镉的测定:石墨炉原子吸收光谱法/ICP-MS法
- GB 5009.17-2014 食品安全国家标准 食品中总汞及有机汞的测定:原子荧光光谱法/ICP-MS法
- GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定:液相色谱-串联质谱法
- GB 5009.34-2016 食品安全国家标准 食品中二氧化硫的测定:蒸馏滴定法
- GB/T 20769-2008 水果和蔬菜中450种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
- GB/T 19648-2006 水果和蔬菜中500种农药及相关化学品残留量的测定 气相色谱-质谱法
检测设备
1. 高效液相色谱仪(HPLC): Agilent 1260 Infinity II(二极管阵列检测器DAD,四元泵,柱温箱范围:室温-100℃)
2. 三重四极杆液质联用仪(LC-MS/MS): Waters Xevo TQ-S micro(ESI源,质量范围:2-2048 m/z,扫描速度≥10,000 Da/sec)
3. 气相色谱-串联质谱仪(GC-MS/MS): Thermo Scientific TSQ 9000(EI源,质量范围:1.2-1100 m/z,扫描速度≥20,000 amu/sec)
4. 电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS): PerkinElmer NexION 2000(质量范围:2-280 amu,检出限:ppt级,动态线性范围≥10⁹)
5. 全自动显微成像系统: Olympus BX53(三目镜筒,透/反射光源,数字摄像头分辨率≥500万像素)
6. 薄层色谱点样与成像系统: CAMAG Linomat 5 / CAMAG TLC Scanner 4(点样精度:±0.2 mm,扫描波长范围:190-800 nm)
7. 全自动水分测定仪: METTLER TOLEDO HX204(称量范围:0-120 g,分辨率:0.1 mg,加热温度范围:40-200℃)
8. 马弗炉: Nabertherm L3/11(最高温度:1100℃,控温精度:±1℃,灰化容积:3L)
9. 全自动微生物限度检测系统: Merck Milliflex Quantum(检测限:1 CFU,过滤速度:≥8样品/分钟)
10. 实时荧光定量PCR仪: Bio-Rad CFX96 Touch(检测通道:6色,升温速度:≥5℃/秒,温度均一性:±0.2℃)
11. 紫外可见分光光度计: Shimadzu UV-2600i(波长范围:190-1400 nm,带宽:0.1/0.5/1/2/5 nm)
12. 电子分析天平: Sartorius CPA225D(量程:0.01mg-220g,重复性:≤0.015mg)
13. 二氧化硫残留测定装置: 全玻璃蒸馏仪(符合《中国药典》2331要求,冷凝管长度:400mm)
14. 恒温干燥箱: Memmert UF260(温度范围:+5℃至300℃,温度波动度:±0.5℃)
15. 高速万能粉碎机: Retsch ZM 200(转速:6,000-18,000 rpm,进样粒度:≤10 mm,出样粒度:40 μm - 6 mm)